一种对玻璃微吸管电极抛光的装置及使用方法.pdf

泸州医学院学报 年 第 卷 第 期 2002 25 1 80 Journal of Luzhou Medical College Vol.25 No.1 2002 一种对玻璃微吸管电极抛光的装置及使用方法 刘智飞，周 文，曾晓荣，杨 艳 （泸州医学院心肌电生理学研究室，四川泸州 646000） 摘 要 目的：对玻璃微电极尖端进行热抛光处理，以提高膜片钳实验中高阻抗封接的质量和成功率。方 法：用双相可控硅增加电流方法，完成低电压高电流输出；利用普通显微镜加以改造，在同一平面内观察电极尖端 和电热丝情况。结果：直流输出电压 ；直流输出电流 ； （物距 ）物镜；光镜和扫描电镜观察电极尖 6V 0 ～ 20A 40 × 1cm 端平整、光滑。结论：利用简单的双相可控硅增流技术和对普通生物显微镜的改造，可以制做出用于玻璃微电极尖 端热抛光的装置。 关键词 细胞膜片钳；玻璃微电极；热抛光 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） R331 A 1000 - 2669 2002 01 - 0080 - 03 自五十年代初细胞内微电极技术开始应用以来，细胞电 电流流过；负相时另一只二极管被导通，可控硅被触发产生 生理研究取得了长足的进展。然而真正深入到对电生理活 电流流过，这样就形成连续不间断的直流电流输出。输出电 动的本质认识，还始于八十年代以来膜片钳制技术的应 流的大小在触发脉冲一定情况下，由触发脉冲的频率决定。 ［］ 用 1 ，该技术方法在较大程度上取决于微吸管电极制作质 量。除对电极进行拉制外，对电极尖端开口面进行抛光处理 ［ ］ 是尖端与细胞膜进行高阻封接（giga - seals）的重要步骤2 3 。 抛光一般可分两种形式：一是细沙打磨抛光、一是热抛光，本 文介绍的是一种热抛光装置及其使用方法。玻璃微电极热 抛光仪目前国内尚无厂家生产，只能依靠进口，这远不能满 足对细胞电生理研究日益增长的需求。特别是一般高等院 校和中等医药院校存在着科研经费短缺，不能全部依赖进口 设备进行科研的实际情况。我们根据使用同类进口设备摸 图1 装置结构图 索到的数据，结合开展细胞膜片钳实验过程中的经验，设计 了用于对玻璃微吸管电极尖端热抛光的装置，现将该装置和 发热材料采用 100 ～ 500 m 直径的铂钨合金丝，绕制成 µ 使用方法介绍于后。 半径约 弧形状或夹角为 左右的“ ”字形状，并在 3 ～ 4mm 45º V 顶尖处用玻璃电极在其烧红时接触一下形成玻璃小球以防 1 装置的结构及工作原理 金属原子蒸发。当绕制的电阻丝通以一定值的电压和电流 1.1 装置的结构 时，电阻丝就会发热至膀红，即可对一定距离的玻璃电极尖 该装置主要由低电压高电流输出系统、发热装置、光学 端进行烧灼使之开口光滑平整。 观测系统、气体流动装置组成（见图 1）。电流输出由可控硅