重组人癌胚抗原的原核表达及其在质控品中的应用.PDFVIP

检验医学 2016 年 9 月第 31 卷第 9 期 Laboratory Medicine ，September 2016 ，Vol. 31，No. 9 ·825 · 文章编号 ：1673-8640 （2016 ）09-0825-05 中图分类号 ：R446.1 文献标志码 ：A DOI ：10.3969/j .issn.1673-8640.2016.09.020 重组人癌胚抗原的原核表达及其在质控品中的应用 李江峰，宋晓丽，钱 伟，矫丽媛，赵晓妮，王继华，才 蕾 （国家地方联合 自检型快速诊断工程实验室 广州万孚生物技术股份有限公司研发 中心质控品实验室 ， 广东 广州 51064 1 ） 摘 要 ：目的 原核表达人癌胚抗原 （CEA ），并将重组蛋 白作 为原材料应用在质控 品的开发 中。方 法 利用基 因工程方法构建原核表达载体pCold 1-cea ，通过大肠埃希菌 BL2 1 （DE3 ）进行原核表达得到重 组人癌胚抗原 （rhCEA ）。结果 得到 了rhCEA 的包涵体 ，经纯化及透析复性后得到可溶 的、具有免疫活 性形式 的重组蛋 白，并将其利用在质控 品的研制 中。研制 出的质控 品在Abbott平 台上 的检测结果为 ：高值 235.35 ng/mL ，中值68.04 ng/mL ，低值 11.97 ng/mL ；在Roche平 台上 的检测结果为 ：高值32.27 ng/mL ，中 值7.99 ng/mL ，低值 1.35 ng/mL ；在Wondfo平 台上 的检测结果为 ：高值5 ng/mL ，中值和低值未能检 出。结 论 原核表达 的rhCEA在不 同检测平 台上 的检测结果相差较大 。rhCEA质控 品更适用于Abbott平 台 ，而不适 合于其他2种平 台。 关键词 ：原核表达 ；癌胚抗原 ；包涵体 ；质控品 Prokaryotic expression of recombinant human carcinoembryonic antigen and its application in quality control materials LI J iangf eng ，SON G X iaoli，QIAN Wei，JIA O Liy uan ，ZHA O X iaoni，WAN G J ihua ，CAI Lei. （National and Local United Engineering Laboratory of High-Efficiency Self -Testing Reagents ，Quality Control Laboratory of Research and Develop ment Center of Guangzhou Wondf o Biotech Co.，Ltd.，Guangzhou 51064 1， Guangdong ，China ） Abstract ：Obj ective To u se prokaryotic cell to express human carcinoembryonic antigen （CEA ）， and use it in the development of quality control materials. Methods Gene engineering methods were used to construct prokaryotic exp ression vector pCold 1-cea ，and the vector was transferred into Escherichia coli BL2 1 （DE3 ） to express recombinant human carcinoembryonic antigen （rhCEA ）. Results The inclusion bodies of rhCEA were f