载羟基喜树碱微泡超声造影剂的制备研究.docVIP

精品论文 参考文献 载羟基喜树碱微泡超声造影剂的制备研究 1南华大学附属第二医院 2南华大学 湖南衡阳市 421001 【摘 要】目的：对微泡超声造影剂的制备方法进行研究探索，应用超声乳法结合SPG微膜乳化器法制备载羟基喜树碱的微泡超声造影剂，通过体内外实验检验载药微泡的超声显影效果和药物控缓释效果。方法：应用超声乳法结合SPG微膜乳化器法制备载羟基喜树碱的微泡超声造影剂，体内外实验检验载药微泡的超声显影效果和药物控缓释效果。结果：超声乳法结合SPG微膜乳化器法制备的载羟基喜树碱微泡超声造影剂，在粒径大小上适合超声显影及使用安全性的需求，在新西兰大白兔心脏超声造影中呈现良好的显影效果，同时能够顺利通过肺循环使左心室充盈成像。结论：超声乳法结合SPG微膜乳化法制备超声微泡造影剂具有更好的均匀度，适合于载药超声造影剂的制备。 【关键词】??泡造影剂；靶向给药系统；药物控缓释；SPG微膜乳化技术 靶向给药系统（targeting drug delivery systems，TDDS）能将药物定向输送到治疗部位，提高治疗部位的药物浓度，减少药物用量，降低不良反应，提高药物的安全性、有效性和患者的顺从性，是目前抗肿瘤治疗领域研究的重点[1-3]。 超声空化效应是强超声在液体中引起的一种特有的物理现象，含有气体的超声造影剂在超声作用下产生压缩和膨胀现象[4，5]。在高声压时，微泡产生非对称性收缩和膨胀，呈非线性背向散射，并易导致微泡破坏；在这一过程中，微泡作为空化核产生空化效应，依靠能量辐射作用，使微泡破坏后释放的药物能够进入血管壁和组织间隙，发挥靶向治疗作用[6-10]。因此，超声造影剂可以作为一种靶向药物治疗的载体。 超声辐照用以增强各种药物传递及其治疗功效的研究近年来受到广泛关注。Loverok等[11]发现，一些药物（如羟基喜树碱）和细胞同时接受超声辐照之后，传递药物的药性和治疗功效可以显著增高。Umemura等[12]报道，使用超声辐照载有卟啉（抗肿瘤药物）的微泡后发现，药物对肿瘤的治疗功效明显提高。 本文对微泡超声造影剂的制备方法进行研究探索，应用超声乳法结合SPG微??乳化器法制备载羟基喜树碱的微泡超声造影剂，通过体内外实验检验载药微泡的超声显影效果和药物控缓释效果。 1.实验方法 1.1.包裹羟基喜树碱PDLLA微泡的制备 参照第二章超声波初乳法结合微膜乳化法制备PDLLA微泡的实验结果，载药微泡制备流程如下：超声作用下，将含不同浓度羟基喜树碱的内水相以1：10的比率，用注射器匀速加入到0.025g/ml PDLLA的二氯甲烷中，制备成稳定的初乳液。 清洗并装好SPG膜，检测SPG膜乳化器各阀透过性，关闭相应阀门，打开循环泵，使外水相在SPG膜管内腔循环流动。 将初乳液加入膜乳化器的压力舱中，盖好舱盖，通过N2减压阀和进气阀门调节压力舱内压力到50kpa左右，关闭进气阀，打开压力舱下端的阀门，使初乳液匀速通过SPG膜分散到外水相中，形成复乳液。复乳液制备期间，每间隔3min快速打开膜乳化器的进气阀门并快速关上，使压力舱内压力保持恒定。当外水相逐渐出现乳白色浑浊乳液直到不再加深后，关闭压力舱下端的阀门、通气阀及循环泵，将复乳液转移到磁力搅拌器中，100rpm/min 40℃过夜搅拌，让二氯甲烷充分挥发。在4℃，3000g条件下离心收集微泡沉淀，蒸馏水洗涤3次后，真空冷冻干燥微泡，使水及二氯甲烷完全升华，获得干燥的白色粉末状微泡样品。 1.2载药微泡粒径测定 称取载药微泡50mg，溶解于2ml氯化钠注射液中，用ZETA SIZER测微泡粒径大小及分布。 1.3 载药微泡表面形态观察 取少量微泡粉末，涂层与双面胶一侧，另一侧固定于扫描电子显微镜的载物台上，真空镀金20s，扫描电子显微镜15kv高压观察5000倍及10000倍下载药微泡表面形态并拍照。 1.4羟基喜树碱吸收波长扫描及浓度/A414nm标准曲线制备 羟基喜树碱吸收波长扫描：以pH9.0 NaOH溶液为空白，对2mg/ml羟基喜树碱pH9.0 NaOH溶液在200nm-800nm内的吸收波长扫描，确定羟基喜树碱的最佳检测波长。 1.5载药微泡包封率、载药率的计算。 包封率：准确称取微泡粉末50mg，溶于500micro;l二氯甲烷中，用500micro;l pH9.0的NaOH溶液萃取，10000rpm/min 室温离心10min，吸取取上清夜，用紫外可见分光光度计在414nm处测定吸光度，以羟基