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DNA快速连接试剂盒.PDF
克 CAT#:70602-30
CAT#:70602-100
必 低温运输，-20℃保存。
隆
系
列
DNA 快速连接试剂盒
Rapid DNA Ligation Kit
使用手册V1.0
北京天恩泽基因科技有限公司
北京市海淀区上地信息路26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506
网址： ；电话：400-6765278 ；电邮：order@
产品及特点 DNA 连接反应通过T4 连接酶催化双链DNA 的3-OH 和5-P 形成磷
酸二脂键而将DNA 共价连接在一起。被连接的DNA 末端可以是粘末端（例
如限制性切割EcoR I 产生的末端），也可以是平末端（限制性切割Sma I
产生的末端）。Pheiffer 等人发现PEG 可以促进T4 DNA 连接酶催化的
连接反应[NAR, 11, 7853-7871, 1983]，连接反应只需十分钟即可完成。
本产品就是根据这一原理设计，其特点如下：
1. 超快，整个连接反应只需要室温5 分钟左右，反应液可以直接用于转
化实验。
2. 高效，溶液配方经过优化，每ug 插入DNA 连接转化得到的重组子可
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达 10 左右。
3. 既可用于平末端连接，也可用于粘末端连接，包括PCR 产物与T 载
体的连接。
4. 简单，客户只需要提供载体和插入片段即可。
规格及成分 成 份 编 号 30 次塑料袋包装 100 次塑料袋包装
溶液A 70602A 150 uL 500 uL
溶液B 70602B 30 uL 100 uL
使用手册 70602sc 1 份 1 份
运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
使用方法 一: 连接反应
1. 在无菌的离心管中严格按下表顺序加入列各成分（以 10 uL体系为
例）:
成分 阴性对照管 样品管
溶液A 5 uL 5 uL
插入片段（自备） - 0.2-0.5 ug(注)
载体（自备） 50 ng 50 ng
无菌水 补水到9 uL 补水到9 uL
注: 插入DNA 片段的摩尔数最好是载体的3-10倍，如果载体长度
为3000bp，则所需插入DNA 片段折合成重量(ng) ＝ (插入DNA
片段bp 数×50 ng ×N) ÷3000 bp。N 就是自己选定的插入DNA
片段与载体的摩尔比。
2. 最后在每管中加入 1 uL 溶液B，轻柔吹打混合均匀后用微
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