基因重组与基因工程课件PPT.ppt

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基因重组与基因工程课件PPT

医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * * DNA重组体的筛选与鉴定 灭活法筛选重组体。 * 提取转化细胞DNA 限制性内切酶 琼脂糖凝胶电泳 与原来载体及重组体比较 DNA重组体的筛选与鉴定 * DNA重组体的筛选与鉴定 菌落 硝酸纤维素滤膜 探针 X线底片 显影 平板 * 基因工程策略 * 第三节、基因工程的应用 生命科学研究趋势 基因诊断和基因治疗 基因工程产品的开发和应用 * 生命科学研究趋势 基因的结构与功能研究 基因表达的调控 各种生物大分子之间的识别及结合 了解生命的奥秘 * 基因诊断和基因治疗 * 基因工程产品的开发和应用 基因工程疫苗:安全廉价 乙肝疫苗、甲肝疫苗 巨细胞病毒、流行性出血热、轮状病毒、 基因工程生产激素类: 胰岛素、生长激素 细胞因子: 生长因子、肿瘤坏死因子、造血因子、干扰素 * 第五节、聚合酶链反应 聚合酶链反应:PCR polymerase chain reaction 耐热细菌:DNA聚合酶能耐高温,在70~80℃有很高的催化力。 原理:以目的DNA为模板,快速合成大量的DNA,用于检测、制备、研究。 * 第五节、聚合酶链反应 变性: 95 ℃、15s 引物粘合:55 ℃、30s 引物延伸:72 ℃、1.5m 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * 医学下载吧 * * 第十四章 基因重组与基因工程 * 基因重组:genomic recombination 重组DNA:recombinant DNA * 第一节、自然界的基因重组 转化:transformation 整合:integration 转导:transduction 转位:transposition * 转化 转化: 由外来DNA引起生物类型改变的过程称为转化。 细菌的转化 * 转化 病毒癌基因感染宿主细胞后,可整合到宿主染色体上,从而使宿主细胞癌变。 转染:噬菌体感染宿主菌后,核酸进入菌体内的过程。 细胞的转化 * 转导 溶原菌中? DNA可以原样地切离出来,也可以把邻近的宿主DNA在切离时带走一部分。后者称转导。 带有宿主DNA的噬菌体称转导噬菌体。 来源于宿主的基因称转导基因。 * 转位 转位:一个或一组基因从一处转到基因组的另一个位置。 这些游动的基因称为转位子(transposon)。 * 转位 * 第二节、基因工程 基因工程:是用分离纯化或人工合成的DNA在体外与载体DNA结合,成为重组DNA,用以转化宿主,筛选出能表达重组DNA的活细胞,加以纯化、传代、扩增,成为克隆。也叫基因克隆或重组DNA技术。 分子水平上操作,细胞水平上表达。 赋予重组DNA以新的生命力。 * 基因工程 肿瘤细胞的转移与细胞表面的糖链类型有关,而后者又与糖基转移酶的表达相关。 已经证实GnT-Ⅴ与转移有关。 转入GnT-Ⅴ基因 肝癌细胞株SMMC7721 观察其迁移、侵袭、粘附等生物学行为 转入反义GnT-Ⅴ基因 转移? 转移? * 基因克隆 分 切 接 转 筛 * 载体和目的基因 载体:vector 在宿主细胞内可独立复制的完整DNA分子。但必须利用宿主的酶系统,才能有进一步的基因表达能力。 常用的载体有: 质粒、 ? 噬菌体 、 M13 噬菌体 逆转录病毒DNA、昆虫病毒DNA 载体与宿主共培育可大量生成,经纯化后可用于基因工程。 * 质粒 质粒:plasmid 环形双链DNA,大小约为数千碱基对,存在于大多数细菌的

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