革兰氏阴性(G-)杆菌产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶状况及耐药性研究.docVIP

精品论文 参考文献 革兰氏阴性(G-)杆菌产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶状况及耐药性研究 朱焕金（广州市花都区妇幼保健院 广东广州 510800） 【摘要】 目的 了解本院目前常见的革兰氏阴性(G-)杆菌菌种分布及产超广谱beta;-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)情况,分析产酶菌耐药谱特征。方法 用法国生物梅里埃公司的VITEK-2细菌鉴定与药敏系统对革兰氏阴性(G-)杆菌进行鉴定，对可疑产超广谱beta;-内酰胺（ESBLs）、头孢菌素酶（AmpC）的菌株，用标准纸片扩散法和三维试验法进行两种酶的表型确证，再用纸片扩散法行药物敏感性检测。结果 检出单产ESBLs、单产AmpC酶、同时产ESBLs和AmpC酶的细菌分别为175株(43.8%)、54株(13.5%)和30株(7.5%)。ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高，为60.3%；AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高，为46.7%。单产ESBLs菌株对亚胺培南、及头孢哌酮／舒巴坦以及哌拉西林/三唑巴坦的敏感性较高，耐药率分别为2.3%、26.3%和33.1%；单产AmpC酶菌株对亚胺培南和头孢吡肟具有较高的敏感性，耐药率分别为3.7%和29.6%；同时产AmpC酶和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感，未发现耐药株。结论 G-杆菌产ESBLs、AmpC酶率较高，该类菌对大多数新型广谱beta;-内酰胺类抗生素耐药，对亚胺培南敏感。 【关键词】 革兰氏阴性(G-)杆菌 ESBLs AmpC酶 耐药性 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）11-0010-02 近年来，随着beta;-内酰胺类抗生素，尤其是头孢菌素的广泛应用，G-杆菌产ESBLs和Ampc酶率越来越高，并出现了(去阻遏)持续高产AmpC酶和质粒介导的AmpC酶，导致耐药菌株广泛传播和临床对该类细菌感染的治疗困难。ESBLs和AmpC酶是介导G-杆菌耐药的最主要的两种酶，均能水解第三代头孢。但两者又有重要的区别，ESBLs可被内酰胺酶抑制剂所抑制，但不被氯唑西林抑制，且部分产ESBLs菌对头孢西丁敏感；而AmpC酶则不被内酰胺酶抑制剂所抑制，可被氯唑西林等抑制剂所抑制，产酶菌对头孢西丁耐药[1]。为了解本院G-杆菌菌种分布及产ESBL酶、Ampc酶的情况及产酶菌株的耐药性，为临床提供用药依据，现对本院2012年1月-12月400株G-杆菌进行检测分析，现报告如下。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌株来源 收集2012年1月-12月本院检验科微生物室鉴定为G-杆菌的菌株400株。 1.1.2 质控菌株 阴沟肠杆菌029M作为持续高产AmpC酶阳性对照，肺炎克雷伯菌ATCC 700603作为AmpC酶阴性对照；大肠埃希菌ATCC 25922作为ESBLs阴性对照；肺炎克雷伯菌ATCC 700603作为ESBLs阳性对照。 1.1.3 仪器与试剂 VITEK-2全自动细菌鉴定与药敏仪及相应的G-杆菌鉴定卡为法国梅里埃公司产品。 1.2 方法 1.2.1 细菌鉴定：所有分离株均由检验科微生物窒从临床送检标本中分离，再用VITEK-2自动细菌鉴定与药敏系统对这些菌株进行鉴定。 1.2.2 ESBLs表型筛选与确认试验：根据NCCLS规则，采用ESBLs检测的初筛及确证试验。通过头孢他啶、头孢噻肟及其与酶抑制剂克拉维酸的联合制剂对待检菌的抑制作用进行测定，当头孢他啶／克拉维酸与头孢他啶抑菌圈直径差值ge;5mm或头孢噻肟／克拉维酸与头孢噻肟抑菌圈差值ge;5mm时，判定为ESBLs阳性。 1.2.3 AmpC酶表型筛选与确认试验：初筛采用纸片扩散法，用头孢西丁(FOX)纸片检测受试菌株，根据NCCLS标准，抑菌圈直径le;17 mm提示对FOX中介或耐药者为疑产AmpC酶菌株。确证试验参照张永标等报道的酶提取物三维试验方法[2]进行。 1.2.4 同时产AmpC酶和ESBLs菌株检测 参照张永标等报道的方法[2]进行。 2 结果 2.1 400株G-杆菌中共分离出7个属10种菌，其中前5位是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌。具体分布情况见表1。 表1 标本类型与菌种分布 2.2 400株G-杆菌产ESBLs和AmpC酶情况见表2。 表