精氨酸牙膏抑制牙釉质脱矿的试验研究.DOC

几种牙膏对牙釉质脱矿抑制作用的比较研究 黄雅静1 赵树蕃2 李月恒1 周智1 黄盛斌2 （1重庆医科大学口腔医学院，重庆 401147；2四川大学华西口腔医学院 ,四川 成都 610041） 【关键词】：精氨酸 ； 牙釉质 ； 抑制；脱矿 【中图分类号】R780．1 【文献标识码】A 唾液蛋白对牙釉质具有屏障的作用，可在一定程度上改变釉质表面的溶解性、化学反应性和通透性；同时具有半透膜的作用，能够减少某些对早期龋造成脱矿有决定性因素的离子，如：钙、磷离子，从而达到抑制釉质脱矿的功效[1]。精氨酸是唾液中蛋白中的一种，目前已被应用于牙本质过敏症的防治，因其被认为可以促进羟基磷灰石形成并封闭开放的牙本质小管，因此我们推测其对牙釉质脱矿具有一定的抑制作用，鉴于目前市场上有多种不同成份和功效的防龋牙膏应用于日常的口腔护理，本研究拟针对其中几种牙膏进行釉质脱矿抑制试验，了解并比较其防龋功能。 1材料与方法 l.l实验材料 酸性缓冲液[2]：50mM醋酸, 1.5Mm 磷酸二氢钾, pH 5.0；中性缓冲液[2]：20mmol/L HEPES, 1.5 mmol/L磷酸二氢钾, pH 7.0；硬组织切割机(Struers SMinitom，丹麦)；抛光机(Struers Lobopol，丹麦)；碳化硅砂纸(Struers，丹麦)；体视显微镜(Nikon，日本)；超声波洗涤器(KQ-SOB型，昆山市超声仪器有限公司)；显微硬度仪(Duramin-1/-2; Struers, Copenhagen, Denmark)；偏振光显微镜(ECLIPSE ME600L, Nikon, Tokyo,Japan) 1.2 方法 1.2.1 牛牙釉质标本的预备[2] 选择新鲜拔除的牛下颌切牙，去除根部软组织，磨除釉质表面的菌斑和色素，冲洗干净后贮存于4℃含有0.05%麝香草酚的去离子水中备用。实验时取出，分离冠根，冠部超声清洗，干燥，体视显微镜(放大10倍)下观察选择无龋损、氟斑、裂痕者使用。共选取下颌牛切牙10颗。用低速硬组织切割机将每个牙冠切成6个4mm×4mm×2mm大小的釉质块，唇面釉质用抛光机及800#-1200#-2400# -4000#碳化硅砂纸在流水下纸依次磨平、抛光，去除表层约150μm，以消除表面有机污染物和表面形态的不规则，以保证各样本之间的一致性。自然干燥，将釉质块表面2mm×2mm开窗，其余部位涂布两层抗酸指甲油。 1.2.2 釉质块分组 本实验具体分组如下，每组10个样本： A: 精氨酸牙膏组 B：酪磷酸蛋白牙膏组 C:含氟0.11%的牙膏组 D：氟化钠溶液(氟离子浓度为0.14%) （阳性对照组） E：去离子水(distilled and deionized water, DDW) （阴性对照组）。 该60块牛牙釉质标本由显微硬度计(Knoop压头，50-g，5s)测量表面显微硬度,于每个釉质标本开窗区的中线处垂直向测5个点，每个点相距100μm，计算其平均值，并进行记录。将选取的50例样本，随机分成五组，每组均含来自10个不同切牙的釉质块各一块，经统计学分析，各组间初始显微硬度SMH1无显著性差异（P0.05）。 1．2．3 牙膏抑制釉质脱矿的作用[2] 牙釉质每日循环包括：每日实验牙膏浆及药物液体处理5min，去离子水处理3x1min，再用酸性缓冲液处理1h,去离子水1min,再置于中性缓冲液5min,其余不作处理时间釉质块均置于中性缓冲液中，各组循环在37℃的条件下重复12次，连续进行6天。于第6天循环处理完成后取出，自然干燥后进行釉质块硬度测试及偏振光样本制备和检测； 1.2.4 显微硬度的测量 脱矿后的釉质标本块仍用显微硬度仪测量其硬度值。采用Knoop压头（50-g，10s）于各标本暴露窗口区原基线测量点的一侧约100um处平行测量5个点，计算其平均值。比较脱矿前后显微硬度的变化值，计算公式如下[2] ΔSMH =SMH1-SMH2 其中SMH1 SMH2分别为釉质脱矿前后的显微硬度值。 1.2.5 偏光显微镜样本的制备和观察[3] 用自凝塑胶将牙齿包埋，经对应的试验液体处理后，低速硬组织切割机从釉质开窗区的中央将牙齿锯开，然后切成约300um厚的牙片，用砂纸打磨成厚约80um，贴附于载玻片上。将牙片浸入去离子水中，进行偏光显微镜观察。数码影像由专用软件(Nikon ACT-1 for L-1，Nikon，日本)获取。并用image analysis system (Image Pro-Plus version 5.1, Media Cybernetics, Inc., Silver Spring, MD, USA)对脱矿深度测量，并进行统计学分析。 1．3 统计学方法 使用SPSSl7.0软件分析实