茵陈蒿汤对庆大霉素抗菌作用的影响.doc

茵陈蒿汤对庆大霉素抗菌作用的影响 [摘要] 目的：探讨茵陈蒿汤是否干预庆大霉素的抗菌作用，为临床上的用药提供依据。方法：体外实验是用浸有不同药剂（即庆大霉素、茵陈蒿汤、庆大霉素混和茵陈蒿汤）的圆纸片法进行大肠杆菌的培养，观察是否有抑菌圈及不同药剂所形成的抑菌圈的不同来得出结论。如体外实验结果为阳性，再进一步进行体内实验。体内实验中，先制作家兔急性胆管炎的模型，再分别用庆大霉素、茵陈蒿汤、庆大霉素和茵陈蒿汤相结合进行治疗，观察治疗效果得出结论。结果：　　庆大霉素注射液抑菌效果最好（即浸有庆大霉素的圆纸片所在的象限中完全没有大肠杆菌生长），而庆大霉素与茵陈蒿汤混合同用后抑菌效果降低（即浸有庆大霉素和茵陈蒿汤混合液的圆纸片周围只形成了极小的环形抑菌圈）。茵陈蒿汤没有抑菌的作用（即在只浸有茵陈蒿汤的圆纸片周围完全没有抑菌圈，布满了细菌）。结论：茵陈蒿汤能干预庆大霉素的抗菌作用。 [关键词] 茵陈蒿汤；庆大霉素 很多人认为中药中没有什么有毒成分，而且和西药一起使用没有什么毒副作用，应该没有什么大的影响。随着对中药研究的深入，我们越来越的发现中药在使用中的禁忌，特别是中西药同用时所出现的问题。 有研究表明，中药有一定程度的抑菌作用，而且有些中药和抗菌素一起使用，会影响抗菌素的抗菌作用。我们觉得有必要通过实验来进行论证。因此，我们选取了庆大霉素与茵陈蒿汤这组药物进行实验。据不完全研究表明，茵陈蒿中所含茵陈色原酮对庆大霉素的抗菌作用有拮抗的影响，但没有具体的研究数据和记录。故我们试图通过体外实验和体内实验两方面进行，探讨茵陈蒿汤是否干预　庆大霉素的抗菌作用，为临床上的用药提供依据。 1 材料与方法 1.1 动物：成年家兔４只（来源：学校实验动物中心） 1.2 实验器材 1.2.1 药品 牛肉膏蛋白胨培养基：由学校实验室提供。 茵陈蒿汤： 茵陈162g, 栀子81g，生大黄54g ；共297g 生理盐水：由上海华源长富制药有限公司生产，批号为0408036 大肠杆菌溶液：为1.5×107个菌数/ml 庆大霉素注射液：2ml:８万单位：由上海中西制药有限公司生产　 1%戊巴比妥钠溶液：3ml/kg 器材 　　高温灭菌锅，37度的培养箱，培养皿（4个），涂菌棒（1根），电子称（1台），滴管（3支） 手术器械：手术刀（4把），组织剪（4把），眼科镊（16把），止血钳（16把），持针钳（4把），缝合针，缝线，动脉夹（8把），玻璃分针（6根） 注射器(1ml的8支) 1.3 实验方法 1.3.1制备茵陈蒿汤的步骤。 取茵陈162g，栀子81g，生大黄54g ；共297g用适量蒸馏水浸泡1小时，然后煎煮。先大火烧开，后文火烧40分钟，到出药液，再加水煎煮。水开后，文火烧20-30分钟，将2次药液用纱布过滤。 　　将药液转移至水浴锅中，100℃水浴, 挥干至297ml，得到生药含量为100%的茵陈蒿汤溶液。 1.3.2体外实验： （1）从297ml茵陈蒿汤药液中提取70ml，浓缩至7ml，另作圆纸片浸液备用（圆纸片均已消毒）。 （2）培养基的制备 将已配制的培养基加热，熔化，均匀地铺于4个平板上，待凝固后即成培养基。 （3）将滤纸片分别浸入：Ⅰ.生理盐水　Ⅱ.庆大霉素溶液（４ml） Ⅲ.茵陈蒿汤７ml的浓缩液　Ⅳ.庆大霉素和茵陈蒿汤混合液（庆大霉素４ml,茵陈蒿汤4ml），一小时后取出纸片，分开置于培养箱中烘干。 （2），（3）步在无菌室内完成。 （4） 取出大肠杆菌冷冻液，室温培养24h待用 （5）涂菌 取一接种环的大肠杆菌溶液，均匀地涂于培养基表面。重复制作四个平板。 （6）用记号笔将培养皿底均匀分成4个象限，各为四分之一圆的面积，并作标记I，II，III，IV。 （7）将已烘干的滤纸片取出若干（每种４片），转移至序号相对应的象限内，培养基放入培养箱内，培养24h。 1.3.3 体内实验： (1)动物分组：4只家兔分为四组，分别标记Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。 (2)手术方法：家兔急性胆管炎模型的制备：参照李仪奎主编的《中药药理实验方法学》1991年6月出版，P477—478，兔急性化脓性胆管炎造模法 A.家兔称重。 B.麻醉：在家兔的耳缘静脉内注射1%戊巴比妥钠溶液，剂量为3ml/kg C．切开、分离和止血： a. 家兔腹部被毛 b. 在腹中线上（剑突下开始）切一纵行的切口，约3—4cm。切开时用左手拇指和食指撑平皮肤，刀刃与切开的组织要垂直，组织要逐层切开。 c. 切开腹腔后，进行钝性分离，用盐水纱布推开肝叶，牵引胆囊，分离总胆管。注意用纱布保护腹腔。 d. 在切开、分离过程中所造成的出血用灭菌纱布或棉球压迫出血部位。对于较大血管的出血，可用动脉夹。 D.注射菌液和结扎： a. 在总胆管紧靠十二指肠处