玻璃纤维培养韧带细胞之可行性.pdfVIP

組織工程計畫結案報告 簡介（ ）與背景說明 I. Introduction 根據 Langer的統計，美國每年至少有十二萬的病人需要進行肌腱或韌帶置 換的手術，在台灣也因為機車為普遍之交通工具，導致車禍前十字韌帶斷裂之情 形較國外更為常見[1] 。目前臨床上處理韌帶或肌腱的斷裂大多是採用自體或異 體移植的方式，或是以人工合成之材料作為取代物。然而目前為止，以合成材料 作為取代物之手術雖然在臨床上相當普及，但材料經過長時間之後仍會有老化等 問題發生，而異體移植目前仍處於臨床試驗之階段，主要的問題為仍無法有效抑 制免疫及發炎反應的發生。因此，找尋合適的方法幫助撕裂肌腱及韌帶之修復仍 是臨床上亟欲解決之課題。 一般生醫材料多為身體組織損壞時之替代品，因此需具有良好之穩定與持 久性、適當的物理化學性質，及良好的生物相容性。並於生醫材料植入人體後能 維持其生理機能。近幾年來由於生醫材料大部分需植入人體，良好生醫材料加上 日益進步的膝部韌帶修復手術技術，將可開發出促進韌帶修復並縮短復健時間的 生醫材料(將此二生醫材料混合製成支架)，另外，在支架內我們也會加入促進韌 帶修復之生長因子及自體韌帶細胞，使該支架一方面可 以促進韌帶組織之修復， 另一方面擁有相當的機械強度可以預防手術後韌帶再次斷裂，再則此一生醫支架 不會引起細胞組織的毒性反應,本計畫預計將玻璃纖維材料做成支架以增進韌帶 的修補。 近年來國外專家學者對細胞培養的研究結果顯示，生醫材料的應用中，生物 體往往只接觸到生醫材料的表面，故材料表面構造的重要性遠大於整體（ bulk ） 構造，（整體構造與機械性質或其他性質較有關聯），而根據過去本實驗室的研究 也發現，材料表面結構的改變確實會對於細胞的貼附及生長有很大的影響，因此 實驗的初步將先探討不同表面性質對於韌帶及肌腱細胞貼附及生長的影響。 組織中的活細胞是藉由一層細胞外基質(extracellular matrices, ECMs)進行貼 附和生長行為， ECM 大部分是由蛋白質(protein) 和聚葡萄胺 (glycosaminoglycans) 所構成。而 ECM已經被確認能調節細胞的多種行為，例如細胞的貼附、生長、 移動和分化等等。而構成這些 ECM的生物分子成份包含有如 fibronectin, collagen, vitronectin, polylysine 和 laminine諸如此類具有黏著性的蛋白質 [2-7] 。因此有鑑 於此，本研究將比較有塗佈 collagen 之玻璃纖維跟未塗佈之玻璃纖維去培養韌帶 細胞之後的結果，塗佈較適合韌帶及肌腱細胞生長之細胞外間質 (Extracellular matrix簡稱 ECM) 。根據文獻，肌腱為連接骨骼與肌肉的組織，而韌帶則為連接 骨骼與骨骼之間的組織，在肌腱及韌帶的周圍都被大量的第一型膠原蛋白 (type-I collagen)及少量的聚葡萄胺 (glycosaminoglycans)所環繞[8-10]。因此，本研究探 討在聚乳酸薄膜表面塗佈不同的 ECM 如 type I collagen 、fibronectin 等，找尋最 適於內側副韌帶細胞及前十字韌帶細胞之 ECM 。 II關鍵材料及方法 (Subject and Methods) ※玻璃纖維製備 本實驗之玻璃纖維使用直接融熔法，不需要先製成玻璃球，直接把各種原料