鸡枞菌菌丝体液体培养对氮源的要求.docVIP

精品论文 参考文献 鸡枞菌菌丝体液体培养对氮源的要求 李　怡　重庆市綦江县古南中学　401420 摘　要：采用不同的液体培养基,在相同的温度和PH值下研究鸡枞菌人工培养的最适氮源，这为人工利用和栽培鸡枞菌提供了一条可能的途径。 关键词：鸡枞菌　液体培养　氮源 鸡枞菌俗称“伞把菇”，属担子菌纲，伞菌目，口蘑科，蚁巢伞属，是一种营养丰富、风味独特的珍贵食用菌，自古以来就是名高誉重的厨珍。它的生长与白蚁有密切关系，生态习性较复杂，培养难度大，迄今为止对人工栽培技术没有得到确切的报道。长期以来，鸡枞菌的驯化栽培是野生食用菌驯化中难度最大的课题之一。 为了早日实现人工栽培以及为工业化生产提供科学依据，本文以鸡枞菌菌丝体生长所需的液体培养基的氮源要求进行了研究。 一、材料与方法 1.合成培养基 蔗糖3%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.1%，水1000ml，加入不同的氮源（分别用20种氨基酸单独培养，再选用最佳的一种进行定量测试，最后将20种氨基酸随机分为5组进行培养）。 2.测试方法 菌体干重的测定：发酵液经滤纸过滤，菌丝体在60℃烘干恒重，用电子天平称重。 3.方法 （1）菌种活化。先在原种中取出一环，接种在母种培养基中，22℃恒温培养5天，即活化。每次活化试管长度均为 15cm，培养基斜面生长度为6cm。 （2）接种量。往母种培养基加入5ml无菌水，洗下菌丝倒入装有45ml无菌水和玻璃珠的三角瓶中，充分振荡，打碎菌丝混匀。每次取出1ml菌悬液接入装有100ml液体培养基的三角瓶，即控制接种量在1%。 （3）培养。加完氮源后，分别用0.5N的盐酸和1N的NaOH调节PH至4.5，各取100ml，121℃湿热灭菌30min，置于22℃、145r/min振荡培养箱中恒温培养72h。重复3次。 二、结果与讨论 1.不同氮源下菌丝生长的结果（见表１） 从表1中可以看出,在以谷氨酸为单一氮源、浓度为0.3%的条件下,菌丝体的得率最高。 2.鸡枞在谷氨酸的不同浓度下生物量的比较（见表2） 从表2中可以看出，在以谷氨酸为单一氮源、浓度为0.37%的条件下，菌丝体的得率最高。也就是说在这种培养条件下，鸡枞菌菌丝体的代谢活动旺盛，将营养物质转化为自身细胞，而增加了个体体重。 3.鸡枞在随机组合的各组氮源中生物量的比较（见表3） 从表3中可以看出，在以亮氨酸0.05%、丝氨酸0.05%、谷氨酸0.093%、赖氨酸0.075%的组合为氮源的条件下，菌丝体的得率最高。 三、结论 1.以得率为目的，经过实验验证，确定在实验室条件下鸡枞菌菌丝体生长的最佳氮源是谷氨酸，其浓度为0.37%；最适温度、PH值分别为20℃、4.5。 2.将20种氨基酸随机组合成5组培养后，确定亮氨酸、丝氨酸、谷氨酸、赖氨酸为一组时，为最佳氮源。 参考文献 [1]杨新美 等 食用菌栽培学[M].北京:中国农业出版社,1996。 [2]朱必凤 马海燕, 赵发清 等 鸡枞菌的液体培养及多糖物质研究[J].真菌学报,1996,15(1):42-47。 [3]姚晓红 陈宛如 董调雅 鸡枞菌的液体培养及菌体成分分析[J].浙江农业学报,2001,13(2):91-93。