生猪重要疫病样品采集要求与实验室检测意义PPT.ppt

生猪重要疫病样品采集要求与实验室检测意义 李峰 研究员 山东省滨州畜牧兽医研究院 山东省生猪创新团队滨州综合试验站 生猪重要疫病实验室检测技术研修班 分享内容 实验室检测的重要意义 实验室检测的主要内容 生猪主要疫病样品采集要求与注意事项 其他样品采集要求 实验室检测的重要意义 明确所发生的疾病种类： 传染性因素：细菌、病毒、支原体、其它微生物； 非传染性因素 单纯感染 /混合感染 是否为人兽共患病 病原分子生物学检测分析 区域优势毒株基因型分析 病原分子进化与演变 病原分子序列与疫苗比对 实验室检测的主要内容 细菌的染色 ↓ 形态学观察 ↓ 培养基的制备 ↓ 细菌分离培养 ↓ 纯化 ↓ 细菌的生化试验 ↓ 药物敏感试验 病猪的剖检 病猪病料的采集、保存 总RNA的提取 ↓ 反转录 ↓ 聚合酶链式反应（PCR） 猪瘟病毒抗体 猪伪狂犬病病毒gPI抗体(野毒) 猪流感血凝抑制试验 猪细小病毒病乳胶凝集试验（LAT） 猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体 ↓ DNA提取 ↓ PCR 血清学检测 分子诊断 细菌分离 ↓ 结果分析 生猪主要疫病样品采集要求 采样原则 1、适时采集 ：尽可能采集到新鲜样品。用于分离病原体的，须在病初发热期或出现典型临诊症状时采集；若制备血清，空腹时采血。尸体上采样，应在动物死后立即采集。 2、典型采样 ：样品具有代表性。选择典型动物，即未经药物治疗、病状典型的动物；选择典型材料，病原体含量最高的材料；尸体采样，采集有病变组织、器官或病变最明显、最典型的部位。 3、合理采样 ：群体发病时，至少采5头动物的病料。每一种样品应有足够的数量。 4、无菌采样 ：无菌操作，尤其是供微生物学检查和血清学检查的样品 5、安全采样：注意人员安全，防止感染，防止病原扩散造成环境污染。 病理剖检 腹部朝上平放 切开四肢 颈部淋巴结 股内则淋巴结 剖检颌、颈部 皮下组织、颌下淋巴结观察 横切胸骨柄，暴露胸腹腔 观察胸腹腔器官变化 纵切胸骨柄 取出胸腔器官 剖开颅腔 暴露脑部 器官 症状/病变 疑似疾病 体表 耳尖、屁股、腹部发紫 微循环障碍：猪瘟、弓形体 背部发紫，规则菱形，边缘整体 猪丹毒 全身通红 链球菌 鼻子流血和/泡沫 胸膜肺炎 背部点状出血、毛孔出血、皮肤发白 附红细胞体、蓝耳病 会阴、臀部、四肢出现周边紫色，中间白色圆形、边缘紫褐色纽扣状坏死 圆环病毒 依据剖检病变推导可能发生疫病 淋巴结 颌下淋巴结肿大，出血性坏死 全身淋巴结有大理石样出血变化 腹股沟浅淋巴结水肿、切口外翻，表面苍白，渗出透明液体 咽、颈及肠系膜淋巴结黄白色干酪样坏死灶 淋巴结充血、水肿、小点状出血 ? 支气管淋巴结、肠系膜淋巴结髓样肿胀 猪炭疽、链球菌病 猪瘟、蓝耳、猪肺疫 圆环病毒2型 猪结核 急性猪肺疫、猪丹毒、链球菌病 猪气喘病、猪肺疫、传染性胸膜肺炎、副伤寒 血液 血液黑或发紫，不凝固 中毒，内源性毒素：弓形体、胸膜肺炎、链球菌、猪丹毒 血液不凝固、稀薄 贫血，蓝耳、附红细胞体 呼吸道 喉头出血 猪瘟 扁桃体化脓、出血 猪瘟、伪狂犬 喉头有泡沫 蓝耳、副猪、传胸 气管有很多粘液 细菌性疾病 肺 出血斑点 纤维素性肺炎 心叶、尖叶、中间叶肝样变 水肿，小点状坏死 粟粒性、干酪样结节 表面零星、边界清楚、湿润肉样变 猪瘟 猪肺疫、传染性胸膜肺炎 气喘病 弓形体病 结核病 流感 心脏 心包积液 心包炎、心外膜炎（绒毛心） 心外膜斑点状出血 心肌条纹状坏死带 心内膜出血 心瓣膜呈菜花样 心肌内有米粒大灰白色包囊泡 副猪、传胸 副猪、传胸、气喘病 猪瘟、猪肺疫、链球菌病 口蹄疫 败血症 链球菌、慢性猪丹毒 猪囊尾蚴病 肝 淤血肿大 沙门氏菌 表面灰白色或灰黄色纤维素 沙门氏菌病、副猪、大肠杆菌 白色坏死点，弥漫性坏死 沙门氏菌、伪狂犬、霉菌毒素、中毒 脂肪肝 传染性胃肠炎、流行性腹泻、仔猪大肠杆菌 胆囊肿大、胆汁粘稠 沙门氏菌 胆囊肿大，胆汁呈黄色泥状 圆环病毒 脾 脾边缘有锯齿状出血、梗死 弥漫性出血 淤血肿大，坏死 脾边缘有小点状出血 猪瘟、仔猪副伤寒 猪瘟、猪丹毒、弓形体、猪肺疫 弓形体病，霉菌毒素中毒（全） 仔猪红痢 胃 胃粘膜斑点状出血，溃疡 胃粘膜充血、卡他性炎症，呈大红布样/麦麸状假膜 粘膜下水肿 胃壁增厚 猪瘟、胃溃疡 猪丹毒、食物中毒 副伤寒 水肿病 水肿、大肠杆菌、魏氏梭菌 肠 乳糜管内无脂肪、出血 病毒性腹泻 乳糜管内有脂肪 细菌、球虫或营养性腹泻 肠壁有白色绿豆大肉芽肿、淋巴滤泡增生 沙门氏菌、食道线虫（大肠）、球虫（结肠、盲肠） 浆膜出血 猪瘟 回盲瓣出血、坏死，盲肠扣状肿 猪瘟 肠粘膜出血 流感、梭菌性肠炎、增生性肠炎 肾 苍白，针尖状出血 猪瘟、伪狂犬 淤血、