铁皮石斜内生细菌的分离鉴定与酶活性分析.PDFVIP

浙江理工大学学报，第 30 卷，第 6 期，2013 年 11 月 lournal of Zhejiang Sci-Tech University Vo l. 30 , No. 6 , Nov. 2013 文章编号: 1673-3851 (2013) 06-0896-05 铁皮石斜内生细菌的分离鉴定与酶活性分析 俞捷，周小凤，胡秀芳 (浙江理工大学生命科学学院，杭州 310018) 摘 要:从铁皮石解组织中分离获得内生细菌 52 株，其中根部分离得到 42 株，茎部分离得到 10 株。编号为 FHGXJ7、 FHGXJ15-1 、 FHJXJ3、 FHJXJ5 的 4 株菌株在 NA 培养基上生长较快、菌落较大且菌落数较多，为优势种 群。对优势菌株进行鉴定及酶活性检测，结采表明 .4 株菌株分别鉴定为芽抱杆菌属未知种、苏云全芽抱杆菌、木糖 氧化无色杆菌和解淀粉芽抱杆菌，这些茵具有不同程度的蛋白酶、淀粉酶、卵磷脂酶和固氮酶活性。 关键词:铁皮石南中;内生细菌5 分离;鉴定;酶活性 中图分类号: Q936 文献标志码:A 作用的内生细菌菌株，进一步为铁皮石角斗的促生研 0 引言 究奠定基础，从而推动铁皮石制产业的发展。 铁皮石角斗CDendrobium officinale) 是中国传 1 实验材料与方法 统名贵中药，具有滋阴清热、益胃生津、润肺明目、补 1. 1 实验材料 肾积精、及提高人体免疫力、防癌、抗衰老等诸多神 奇的治疗与保健功能[IJ 。然而，铁皮石制自然资源 供试铁皮石磨↓样品采自浙江奉化种植基地。 濒临灭绝，人工种植已成为铁皮石制植物原料的主 分离培养基:牛肉膏蛋白陈培养基CNA)C蛋白 要来源。因此，促进人工种植铁皮石剧的生长以及 陈 10 g ，牛肉膏 3 g ,NaCl 5 g ，琼脂 15 g , HzO 1 000 保持其药效成分成为铁皮石制产业的重要课题。 mL ,pH 7. 4~7. 的。蛋白酶活性检测培养基采用 铁皮石制内生菌(包括内生真菌和内生细菌)在 脱脂牛奶培养基(脱脂奶粉 15 g ，琼脂 15 g , HzO 其生长和发育过程中扮演重要角色。大量研究显 1000 mL ,pH 7. 0~7. 2); 淀粉酶活性检测采用可 示，内生真菌具有促进铁皮石剧种子萌发[zJ 促进 溶性淀粉培养基(可洛性淀粉 10 g , CNH4)ZS04 2.5 C、 N、 P 等营养物质的吸收回，分泌植物生长激素[4J g , K HP0 3 g , MgS0 • 7H O o. 2 g , FeS04 • z 4 4 z 等作用;内生细菌对宿主植物也有积极作用，主要包 7H O o. 025 5 g ，蛋白陈 5 g , CaCl O. 13 g , pH z z 括固氮作用[叫、促进矿质元素吸收[7J 、产生植物激 5.5) ;磷脂降解酶活性检测用卵磷脂培养基(膜蛋白 素〔町、分泌抗生素类物质抵御植物病原菌的侵害[9J 陈 10 g，酵母膏 3 g , NaCI 5 g，琼脂粉 20 g , HzO