2017年微生物学复习思考题(二)华南师大鲁欣.docxVIP

2017年微生物学复习思考题（二）1.什么是定向育种，如何在生产中应用？定向育种是指在某一特定条件下，长期培养某一微生物菌群，通过不断转接传代以积累其自发突变，并最终获得优良菌株的过程。生产中的应用：由于自发突变的频率较低，变异程度较轻微，故用此法育种十分缓慢。通常用于培育减毒抗原疫苗的获得。2.什么是诱发突变，结合微生物学实验课的内容，物理诱变的原理及注意事项？诱发突变是通过诱导使突变加速产生。物理诱变原理：①紫外线：其主要机制是胸腺嘧啶二聚体的形成，可作用在一条链或两条链，前者则使双链的解开和复制受阻，后者则会破坏腺嘌呤的正常掺入和碱基正常配对，从而导致突变的产生。②X射线和γ射线：其直接效应是使碱基间、DNA间、糖与磷酸间相接的化学键断裂；间接效应是电离作用引起水或有机分子产生自由基作用于DNA分子，导致缺失或损失。③快中子、热和激光等也用作诱变剂，快中子生物学效应与X射线基本相同，并具有更大的电离密度。热可使胞嘧啶脱氨基变成尿嘧啶，从而引起碱基配对的错误。热还可引起鸟嘌呤脱氧核糖键移动，从而在DNA复制时出现碱基对的错配。注意事项：用紫外线照射进行诱变育种工作时，必须在红光下进行处理货操作，并在黑暗条件下培养，以免发生光复活作用；物理诱变本质是通过辐射影响生物体的基因，在操作中要注意避免被辐射，造成生理伤害。3.诱变育种的原则及营养缺陷型的筛选？诱变育种的原则：①出发菌株的挑选：具有有利性状（如高产、生长速度快、营养要求粗放、标志明显等）及对诱变剂的敏感性；②敏感期和合适对象的选择：敏感期，如菌体的对数期，孢子或芽孢的萌发前期；合适对象，如孢子、芽孢，因其多为单核状态；处理前制成单孢子或单细胞悬液，使其能均匀接触诱变剂，并能减少诱变后性状的分离；③诱变剂的选择：方便性和有效性；④诱变剂量的选择；在偏低的剂量中正突变率反而更高；⑤初筛：即粗筛，如透明圈法、抑菌圈法和颜色变化等方法⑥复筛：即精细筛选，通常用液体摇瓶培养方法，直接检测所需的产物量。营养缺陷型的筛选：在诱变的过程中通过中间培养、淘汰野生型、营养缺陷型检出、营养缺陷型检出等步骤，最终筛选出营养缺陷型。4.什么是基因工程，基因工程中的酶学及简要操作过程？基因工程是指人工方法，通过体外基因重组和载体的作用，使新构建的遗传物质组合进入新个体，并在此新个体中得以稳定地遗传和表达的过程。基因工程中的酶学：基因工程中的基因分离、重组涉及一系列的酶促反应，主要的酶有：限制性核酸内切酶、限制性核酸外切酶、反转录酶和连接酶等。基因工程的简要操作：①获目的基因；②体外重组；③载体传递；④选择和筛选；⑤载体保藏法；⑥悬液保藏法；⑦宿主保藏法。5.什么是合成生物学，什么是菌种退化和复壮及菌种保藏的原理和方法？合成生物学：通过设计和构建自然界中不存在的人工生物系统，以解决人类社会的重要问题。菌种退化是指群体中退化细胞在数量上占一定数值后，表现出菌种生产性能下降的现象。菌种复壮：在退化菌种中，用人工方法，使仍保持原有特性的细胞生长、繁殖，以更新退化的菌株。菌种保藏的原理：人为地创造合适的环境条件，使微生物的代谢处于不活泼、生长繁殖受到抑制的休眠状态。菌种保藏的方法：①冷冻干燥保藏法；②液氮保藏法；③斜面保存法；④液体石蜡覆盖保藏法。6.谈谈淡水生境、海水生境的微生物？淡水生境的微生物：淡水生境适合多数微生物的生长，由于受营养等因素限制，水体中的微生物的种类和数量一般比土壤中少。对于清洁的水体，有机物含量少，微生物总数不高（10~103个/mL），细菌常以自养型为主；水体由于富营养化作用或生活污水的排放而含有丰富的营养，微生物的数量和种类明显增多，其中以腐败型细菌、真菌和原生动物为主；对于河流这种流水生境，其中的微生物来自空气、土壤、生活污水及动植物残体等，微生物数量和种类岁河流营养变化而出现演替；海水生境的微生物：适应于次生境的微生物具有嗜盐或耐压、嗜冷或低营养要求等特点。在近海岸和接近海底淤泥层的海水中菌数较多，远离海岸菌数较少。垂直分布也不均匀，表层0~10m较少，10~50m随深度有所增加，50m以下数量随深度增加而减少，在接近海底沉积物的深水，微生物数量增多；海洋细菌多为革兰氏阴性，具有鞭毛和色素。7.谈谈人体和工农业产品中的微生物？人体中的微生物：机体在健康情况下与外界隔绝的组织和体液是不含菌的。在人体及动物体皮肤、毛发表面及与外界相接相通的腔道如口腔、胃肠道、外耳道、上呼吸道和泌尿生殖器官等生存着不同的微生物群落。在正常情况下生活健康个体各部位的微生物数量与种类相对稳定，且对机体有益而无害的称为正常菌群。一般情况下正常菌群与机体保持着平衡状态，但平衡状态是相对的，当机体机能减弱、正常菌群生长部位发生改变或各菌群间的相互制约关系被破坏，这种平衡就有可能被打破，一些正常菌群会成为对