卫生化学精品教学（中山大学）第四章 紫外-可见分光光度.pptVIP

第四章 紫外-可见分  光光度法 紫外-可见分光光度法是根据物质分子对紫外-可见光区电磁辐射的吸收特性建立起来的一种光谱分析法。 　较高的灵敏度和准确度， 　检出限可达到10-7g/ml， 　相对误差通常为1～5％。 第一节 紫外-可见分光光度法的基本原理 一．电磁辐射与电磁波谱 电磁辐射(Electromagnetic radiation) ：一种以巨大速度通过空间传播的光量子流，是能量的一种形式，它是物质的分子、原子的内部运动以辐射的形式在外部的表现。 电磁波谱(Electromagnetic spectrum) ： 　电磁辐射按波长顺序排列称为电磁波谱。 光量子流既具有波动性，又具有粒子性，光在传播时表现了它的波动性，光与物质发生作用时表现出它的粒子性，即波粒二象性。普朗克方程式：E = h ? = hc/?  E 为能量； h为Plank常数； ?为频率；c为光速; ?为波长 不同波长的光具有不同的能量，光的能量与其波长呈反比。 在不同的波谱区域具有不同的辐射类型，它们与物质作用的形式也不相同。由此建立了各种光谱（波谱）分析法。 电 磁 波 谱 紫外-可见吸收光谱(Ultraviolet-visible absorption spectrum)的产生:当光通过气态、液态或固态的物质时，物质的分子选择性地吸收辐射，产生紫外-可见吸收光谱，又称为分子吸收光谱。 在不同波长下测定物质对光的吸收程度（吸光度），以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标所绘制的曲线，称为吸收曲线(absorption curve)，又称吸收光谱(absorption spectrum)。最大吸收波长（λmax）肩峰(shoulder peak) 末端吸收（end absorption)  有机化合物的吸收光谱：根据分子轨道理论，在有机化合物分子中有几种不同性质的价电子：形成单键的σ电子；形成双键的π电子；未成键的孤对n电子。不同电子处于不同的能级轨道，具有不同的能量。 当分子吸收具有一定能量的光子时，就由较低的电子能级E0（基态）跃迁到较高的电子能级E1（ 第一激发态）。被吸收光子的能量必须与跃迁前后的能级差?E分子恰好相等，否则不能被吸收。? E分子= E1－E0=hν=hc／? 当有机化合物吸收一定的能量后，这些价电子就跃迁到能级更高的能级轨道而呈激发态。这时电子所占的轨道叫σ*、π*反键轨道。 未受激发的较稳定的状态（称）为基态。 分子中价电子可能的跃迁方式有以下几种类型，如图所示。各种跃迁所需能量大小的顺序为： σ→σ*＞ n→σ*≥π→π*＞ n→π* 无机化合物的吸收光谱 许多无机化合物的分子或离子也可对紫外-可见光产生选择性吸收，发生电子能级跃迁，但吸收特性和吸收过程与有机化合物有所不同。常见的无机化合物的吸收可分为以下几种类型： （一）d-d跃迁和f层电子跃迁 过渡金属离子的多数配位化合物在紫外-可见光区有吸收。这种吸收是由d轨道间的跃迁引起的。 一些常见配合物的配位场强度变化顺序为：I-＜Br-＜Cl-＜F-＜OH-＜C2O42-≈H2O＜SCN-＜吡啶≈NH3＜乙二胺＜联吡啶＜邻二氮菲＜NO2-＜CN- 配位场强度越大，分裂后的d轨道能级差越大，吸收波长越短，如Cu(H2O)42+的吸收峰为749nm，呈浅蓝色，而后Cu(NH3)42+的吸收峰为663nm，呈深蓝色。 （二）电荷迁移跃迁 电荷迁移跃迁，是指吸收跃迁的发生是由于在光子的作用下，配合物中的某一组分（金属离子或配位体）的电子向主要属于另一组分的轨道转移所引起 一般金属离子，特别是高价的金属离子如Ce4+、Fe3+、Cu2+等是电子接受体，而配位体如水、H2O2、SCN-等是电子给予体。这时，电荷迁移跃迁所需的能量与电子给予体的电子亲和能有关，电子亲和能越小，激发所需的能量将越低，电荷迁移跃迁吸收波长越长。 MnO4-、CrO42-、VO43-、Cr2O72-、 NO3-、SO42- 、NO2-等离子产生的在紫外-可见光区的吸收亦可能是电子由氧原子转移至金属元素d轨道的过程，也属于电荷迁移跃迁。电荷迁移跃迁的特点是跃迁几率大，相应的摩尔吸光系数都可达104左右。 （三） π→π*跃迁这类跃迁一般只发生在金属离子与具有共轭结构的有机试剂所形成的配位化合物中。这些配位化合物的吸收光谱是由金属离子影响下的有机试剂π→π*跃迁所产生。 金属离子使有机试剂的π轨道与π*轨道之间的能级差减小或增大，使