第四章 原生质体融合.pptVIP

第四章 动植物细胞融合一、动物细胞融合与单克隆抗体 二、植物原生质体的制备与融合;一、动物细胞融合与单克隆抗体 （一）概念 细胞融合又称体细胞杂交，是指两个离体细胞通过一定诱导技术使质膜接触而融合在一起，随后导致两个细胞核物质融合的技术。 ;细胞融合图; （二）细胞融合的常用方法;用灭活的病毒诱导的动物细胞融合过程示意图 ;聚乙二醇（PEG）法细胞融合过程;（三）单克隆抗体;;;人体内的五种抗体;;动物脾脏有上百万个B淋巴 细胞，一个细胞就是一个克隆，它针对抗原上的一个抗原决定族产生的抗体是单克隆抗体。一种抗原通常具有多个不同的抗原决定族，因此能刺激多个B淋巴细胞产生相应的单克隆抗体，因此血清中的抗体是针对不同抗原决定族的单克隆抗体混合物，称为多克隆抗体。;;单克隆抗体: 只针对某一抗原决定簇的抗体分子称为单克隆抗体。;2、单克隆抗体技术（杂交瘤技术）的基本原理;3、单克隆抗体(杂交瘤细胞)的制备;淋巴细胞：经过免疫处理的淋巴细胞，多用大鼠或小鼠。 免疫方法：体内法或体外法。 体内法：对细胞或微生物抗原可直接注射如小鼠体内，可溶性蛋白抗原可与等量的福氏完全佐剂混合乳化后，注入到动物体内。3－4天后，在无菌条件下可以取出脾或淋巴结制成悬液，存活率在95％以上的可以用于融合。 体外法：直接提取大、小鼠淋巴细胞，调整为107个/m