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医学论文-地塞米松诱导小鼠腭裂动物模型的建立 ??????????????? 作者：刘贤 齐志丽 刘杨 田悦明 王浩宇 吴靖芳 郑慧娥 任君旭 安峰 【摘要】? 目的：探讨地塞米松诱导小鼠腭裂动物模型的建立方法。方法：采用一次性腹腔注射地塞米松的方法，建立腭裂模型鼠。取孕12.5d、13.5d、14.5d、15.5d、16.5d胚胎头部，石蜡包埋，6μm切片，HE染色，观察腭发育过程腭突的变化。结果：妊娠第11.5d一次性给予地塞米松(Dex)1mL(用量为50mg/Kg)可诱发小鼠产生腭裂。模型组腭突体积瘦小，不能在中线区接触融合，以致不能与腭突上方的鼻中隔接触融合，胎鼠出现腭裂。结论：妊娠第11.5d一次性给予小鼠足量地塞米松，可成功建立腭裂动物模型。为研究腭裂形成原因及分子机制提供了一个较好的模型。 【关键词】? 地塞米松；腭裂；模型/动物 ??? 【ABSTRACT】? Objective：To investigate the method of constructing the model of cleft palate induced by dexamethasone(DEX)．Methods：The cleft palate mouse embryo model was got by injecting DEX intraperitoneally into Kunming mice．The heads of the mouses embryo were got? from GD12.5 to GD16.5,then fixed with Bouins solution,embedded by paraffin,sectioned 6μm and HE stained．The changes of palatine process were observed during the development course of cleft．Results:Cleft palate at GD 11.5 could be induced by injecting DEX at the dose of 50mg/kg once.The palatine process and anasl septum,which could not contact and merge each other,was thin and small in the model group so as to develope palate cleft on the embryo．Conclusion:Injecting enough dose DEX once at GD11.5 can induce the cleft palate mouse embryo model successfully．It is a perfect model for studying the reasons and mechanism of cleft palate forming． ??? 【KEY WORDS】? Dexamethasone,Cleft Palate,Models/Animal ???? 腭裂动物模型在腭裂病因学、形成机制及治疗方法等研究中具有重要作用[1]。先天性腭裂的发生率约为0．1%，其发生主要是由于早期发育过程中腭突融合障碍所致，通常是遗传及环境因素相互作用的结果，其中妊娠早期误服药物也可能是其发生原因之一。在胚胎发育过程中腭的正常发育在很大程度上取决于环境因素，与腭裂发生有着密切的关系。胚胎腭器官发生期是器官的形成过程，同时又是胚胎的致畸敏感阶段。本实验拟通过对胚胎发育的渐进性形态学观察，揭示腭发育及腭裂形成过程，从而建立腭裂动物模型。 ??? 1? 材料与方法 ??? 1．1? 实验动物 ??? 成年健康未生育昆明小鼠（体重为22～25g）（北京大学医学部实验动物中心），胎鼠为孕12.5d、13.5d、14.5d、15.5d、16.5d（足月为19～21d）。 ??? 1．2? 实验材料 ??? 试剂：醋酸地塞米松注射液（华北制药集团）、PBS液（0．01M）、Bouins固定液、酒精、苏木精伊红染液、生理盐水；仪器：OLYNPUS BX31，Motic 6.0医学图像分析系统和手术器械，如镊子、解剖刀、解剖剪、止血钳、注射器、培养皿。 ??? 1．3? 模型的建立方法 ??? 随机选取健康、生活状态相近的小鼠，雌雄按2∶1于晚18∶00合笼，并于次日早7：30检查雌性小鼠的阴栓，查见阴栓之日定为孕0d（0GD），第11天14∶00定为孕11.5d（11.5GD）[2]。所有小鼠均自由饮水及标准小鼠饲料喂养，孕鼠随机分为模