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医学论文-邪毒壅盛证H22荷瘤小鼠肿瘤组织基因的表达特征研究 ??????????? 作者：卓少元 方肇勤 卢文丽 潘志强 梁超 吴中华 刘小美 侯俐 张辉 廖明娟 高必峰 【摘要】? 　　目的揭示H22 荷瘤小鼠邪毒壅盛证肿瘤组织基因表达的特征。方法采用GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术及芯片分析方法，观察H22荷瘤小鼠邪毒壅盛、早期气虚、中期阳气虚及中晚期气阴阳虚证肿瘤组织基因表达的差异。结果筛选到邪毒壅盛证独特性高表达的基因32个，其中包括Tcte3、Phf7、Ldhc等参与睾丸发育、精子或卵子发生的基因22个，Adipoq、Nrcam、Tnfaip6等与肿瘤有关的基因4个，以及Atp8b3、Pnpla3、Retn等其他功能的基因6个。筛选到邪毒壅盛证独特性低表达的基因2个，有Cort和LOC668417。结论邪毒壅盛证H22荷瘤小鼠肿瘤组织中存在大量独特性表达的基因，可能是该证候与其他证候区别的内在特征。 【关键词】? 肿瘤； 证候； 同病异证； 邪毒壅盛证； 基因芯片； 小鼠 　　Abstract：ObjectiveTo investigate genes expression profile in tumor tissues of H22 mice with obstruction of evil syndromes. MethodsGenes expression in the tumor tissues of H22 mice with syndromes of obstruction of evil syndromes, “Qi” deficiency, deficiency of “Qi and Yang”, or deficiency of “Qi Yin and Yang”, were analyzed by Affymetrix GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array. Results32 special higher-expression genes were observed, including 22 genes which involve in testicle growth, spermatogenesis or oogenesis, 4 genes related to tumors, and 6 other gene. Simultaneously, 2 special lower-expression genes were observed. ConclusionNumerous genes have special expression in the tumor tissue of H22 mice with obstruction of evil syndromes, which may be intrinsic difference between this syndrome and 3 other syndromes. 　　Key words：Tumor;?? Syndrome;?? Different Syndrome for the same disease;?? Obstruction of Evil Syndromes;?? Genechip;?? Mice??? 　　“同病异证”和“同病异治”是中医理论的特色之一，其内在物质基础是什么，是长期以来被关注和研究的课题。本项目组以往的研究建立起H22荷瘤小鼠常见证候的标准化检测与辨证［1～4］，发现随着肿瘤的发展，荷瘤小鼠会自发形成证候并发生演变，早期以邪毒壅盛证和气虚证为主，以后发展为阳气虚证和??阴阳虚证，与人类十分相似［5，6］。为揭示“同病异证”物质基础，我们采用Affymetrix的GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array技术，对H22荷瘤小鼠邪毒壅盛证、气虚证、阳气虚证和气阴阳虚证4个常见证候的肿瘤、下丘脑、垂体、肾上腺等组织基因的表达进行了检测。本文重点探讨邪毒壅盛证H22荷瘤小鼠肿瘤组织基因表达的特征。现报道如下。 　　1?? 材料与方法 　　1.1?? 芯片检测数据的获取 采用项目组最近研究获得的4种常见证候荷瘤小鼠肿瘤组织的外显子芯片数据：昆明种小鼠［购自上海中医药大学动物实验中心，雄性，体重24 g～26 g，合格证号SCXK（沪）2003-0003，清洁级］，腋下接种H22肿瘤腹水癌细胞后，采用小鼠计量化四诊和辨证方法［1］，筛选出最典型的早期（接种后8 d）邪毒壅盛证和气虚证，中期（接种后21d）阳气虚证和中晚期（接种后29 d）气阴阳虚证荷瘤小鼠各16只，并分别提取4个不同证候小鼠肿瘤组织RNA，将各证候