运用crispr_cas系统对植物基因组进行定点编辑_宋时奎.pdfVIP

分子植物育种，2014 年， 第12 卷，第6 期，第1059-1066页 Molecular Plant Breeding, 2014, Vol.12, No.6, 1059-1066 特邀评述 Invited Review 运用CRISPR/Cas 系统对植物基因组进行定点编辑 1,2 1 2 1 1 1* 2* 宋时奎 王影 于洋 耿立召 张春翔 李相敢 韩天富 1 先正达生物科技( 中国)有限公司, 北京, 102206; 2 中国农业科学院作物科学研究所, 北京, 100081 * 通讯作者, xianggan.li@; hantianfu@ 摘 要 随着转基因技术的发展，出现了多种对基因组进行定点编辑的新技术。本文介绍了常用的植物基 因组定点编辑技术的基本原理，特别对新近发展起来的CRISPR/Cas 系统的原理、组成及各元件的作用等 进行了综述，比较了CRISPR/Cas 系统与ZFN、TALEN 等常用定点编辑技术的异同。文中列举了利用 CRISPR/Cas 系统对几种单子叶和双子叶植物进行基因组定点编辑的案例，认为通过CRISPR/Cas 系统对植 物基因组进行定点编辑是可行的，特别是由于嵌合sgRNA 的成功设计，使得应用CRISPR/Cas 系统更加简 单方便。研究人员正在努力降低CRISPR/Cas 系统的毒性和脱靶率，拓宽该技术的应用空间。 关键词 植物基因组, CRISPR, Cas9, crRNA, sgRNA, 定点编辑 Plant Genome Editing with CRISPR/Cas System Song Shikui 1,2 Wang Ying 1 Yu Yang 2 Geng Lizhao 1 Chang Chunhsiang 1 Li Xianggan 1* Han Tianfu 2* 1 Syngenta Biotechnology China Co., Ltd., Beijing, 102206; 2 Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing, 100081 * Corresponding authors, xianggan.li@; hantianfu@ DOI: 10.13271/j.mpb.012.001059 Abstract With the advance of transgenic technology, several site-specific methods for genome editing have been developed. The general characteristics of site-specific editing process are reviewed in this paper with emphasis on the principle, components, and functions of the new CRISPR/Cas system. The advantages of CRISPR/Cas system over ZFNs and TALENs are also evaluated. Several monocot and dicot species with site-specific modifications by CRISPR/Cas are used as examples to demonstrate the versatility of using single guide RNA (sgRNA) in the system as a convenient approach for plant genome editing. Improvements to reduce its toxicity and off-target editing are in progress for future application of CRISPR/Cas system. Keywords Plant genome, CRISPR, Cas9, crRNA, sgRNA, Site-specific editing 在传统的转基因技术中，外源基因(DNA 片断) 因的定点编辑。DNA 双链断裂时会引发细胞内一系 进入植物细胞后随机