分子生物学技术在血液疾病诊疗中的应用.pdfVIP

分子生物学技术在血液疾病诊疗中的应用 山西医科大学第二医院 王 刚 2017.10.15 望、闻、问、切 超声、影像 血尿便常规、生理生化 基因检测、分子诊断 分子诊断能帮助我们什么  揭示疾病本质，准确进行疾病诊断  合理分层，选择合适的治疗方案  预后判断、疗效评价 目录 1 恶性血液病融合基因的检测 2 血液病突变基因的检测 3 二代测序在AML诊断及预后中的应用 4 遗传性血液病的诊断 5 遗传性血液病的基因治疗 恶性血液病融合基因的检测  染色体相互异位 染色体重排 分子水平  染色体重排 融合基因 融合蛋白 特异性分子标志  疾病的诊断  疾病的分型  治疗方案的选择  预后判断  微小残留病（MRD ）的检测 恶性血液病融合基因的检测  慢性粒细胞性白血病（CML ）  Ph染色体易位  9q34 ABL原癌基因  22q11 BCR基因  BCR-ABL融合基因  高酪氨酸激酶活性  TKI治疗 对于不明原因的白细胞显著增多，可常规检测BCR-ABL融合基因 用于鉴别诊断 恶性血液病融合基因的检测  急性早幼粒细胞白血病（APL ）  t （15 ；17 ）（q22 ；q21 ）  15q22 PML原癌基因  17q21 RARα基因  PML-RARα融合基因  ATRA/ATO治疗 检测到t （15 ；17 ）或PML-RARα融合基因，即使骨髓或外周血原 始细胞比例不达20% ，亦可确定诊断 血液病突变基因的检测  骨髓增殖性肿瘤（MPN ） 真性红细胞增多症（PV ）、原发性血小板增多症（ET ）、特发性骨髓纤维化（PMF ）  基因突变可分为“表型驱动突变”和“非表型驱动突变”  表型驱动突变主要包括JAK2突变、MPL突变和CALR突变，可导致 JAK/STAT信号转导通路异常活化，与骨髓增殖直接相关  非表型驱动突变通过修饰表型驱动突变功能参与疾病过程 血液病突变基因的检测  约85%的MPN患者存在JAK2、MPL和CARL中的至少1种驱动突变， 没检测到这3种突变的患者被归为 “三阴性” 血液病突变基因的检测  约93%以上的PV、53%以上的ET和58%以上的PMF可检测到 “JAK2-V617F ”突变  JAK2-V617F突变是JAK2基因第617位氨基酸由缬氨酸突变为苯 丙氨酸 ，导致EPO、TPO、GM-CSF、IL-3、GH等多种细胞因子 过度表达  对不明原因的红细胞或血小板增多，可常规检测JAK2-V617F基 因突变，用于鉴别诊断 二代测序在AML诊断及预后中的应用 第二代高 通量测序 技术；各 种遗传学