苏云金杆菌辅助蛋白P19对杀虫晶体蛋白Cry11Aa表达的影响.pdfVIP

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2018-04-07 发布于北京
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苏云金杆菌辅助蛋白P19对杀虫晶体蛋白Cry11Aa表达的影响.pdf

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卷期 ! # 微生物学报（）： ! # ## ’ #( 年月日 $%% ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! )*+, $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 苏云金杆菌辅助蛋白!# 对杀虫晶体蛋白$%’( 表达的影响，， / $ / # / / / 师永霞，曾少灵，袁美妗，孙钒，庞义 / （中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室广州 /%$( ） $ （南方医科大学基因工程研究所广州 /%/ ） # （深圳出入境检验检疫局动植中心深圳 /2%/% ）摘要：苏云金杆菌以色列亚种的基因、基因和基因位于同一操纵子上，据推测辅助蛋白可能 ! /- #$ //D5 ! $% E/- 与 FGA//D5 蛋白的晶体化相关。本研究利用穿梭载体 HI0#/%/ 构建了两个重组质粒 HI?A/ 和 HI?A# ，两质粒均携带 #$ //D5 基因，但后者完全缺失了 #$ //D5 基因上游的! /- 基因。将重组质粒电激转化至苏云金杆菌无晶体突变株中进行蛋白表达，结果表明在（）和（）中均能检测到正常表达的蛋白，但 !J( KLK3ED.7 !J( HI?A/ !J( HI?A# FGA//D5 单位体积培养液的FGA//D5 蛋白在辅助蛋白E/- 存在时的表达量明显高于其单独表达的表达量；透射电镜观察显示两菌株中的FGA//D5 蛋白形成了大小相近、形状相似的双梯形晶体；另外，生物测定结果表明重组菌株 !J( （）和（）对三龄致倦库蚊的杀虫活性没有显著性差异。该现象说明辅助蛋白的缺失对 HI?A/ !J( HI?A# E/- FGA//D5 蛋白的晶体形成和杀蚊活性没有影响，但 E/- 作为分子伴侣在一定程度上帮助提高了FGA//D5 蛋白的表达水平。关键词：苏云金杆菌；辅助蛋白E/- ；晶体蛋白FGA//D5 ；生物测定中图分类号：文献标识码：文章编号：（） J(2 D %%%/3$%- $%% %#3%##3% 苏云金芽孢杆菌（