全血基因组DNA的提取医学课件.ppt

实验一 全血基因组DNA的提取 真核基因组DNA的分离纯化 （1）核酸包括DNA、RNA两种分子，在细胞中都 以与蛋白质结合的状态存在。 （2）真核生物的染色体DNA为双链线性分子； 核酸提取的主要步骤： 一般为破碎细胞，去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂类等生物大分子，去除其他不需要的核酸分子，沉淀核酸以去除盐、有机溶剂等杂质，最后得到纯化的核酸。 一、实验目的与意义 （一）目的：掌握全血DNA提取基本技能。 （二）意义：基因组DNA含有细胞中全部的遗传信息， 从全血中提取DNA是遗传性疾病、胎儿产前无创 伤诊断、肿瘤和传染性疾病等的早期确诊的重要 手段和技术，DNA提取的质量和产量直接影响PCR 扩增、分子克隆、限制性内切酶的酶切反应等试验 的成败。 （三）常用提取方法： 有机溶剂抽提法（氯仿-异戊醇法） 盐析法（经典Miller盐析法） NaI法 …… 二、实验原理 从全血制备白细胞DNA，可用双蒸水溶胀红细胞及白细胞膜，释放出血红蛋白及细胞核，使核酸处于易提取状态，加NaI破核膜并使DNA从核蛋白中解离，用氯仿/异戊醇抽提