分析化学--第十章 紫外-可见分光光度法.pptVIP

苯的B带吸收光谱 描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系 表示方式： 1、摩尔吸光系数ε 在一定λ下，C=1mol/L，L=1cm时的吸光度 2、百分含量吸光系数 / 比吸光系数 在一定λ下，C=1g/100ml，L=1cm时的吸光度 两者关系： E1% 1cm 例：已知Fe2+ C ：0.5mg/L l：2 cm A：0.19(λ508nm） 求：ε，E1%? 1cm 解： C(Fe2+) = =8.9×10-6mol/L A=εCl 0.5×10-3 55.85 ε= A Cl =1.1×104(L/mol.cm) =0.19/(2×8.9×10-6) E1% 1cm = 10 × =2.0 ×103(ml/g.cm) 1.1×104 55.85 六、偏离Beer定律的因素 依据Beer定律，A与C关系为 经过原点的直线 （一）化学因素 （二）光学因素 偏离Beer定律的主要因素为 （一）化学因素 离解、缔合、溶剂化、形成新化合物等因素发生偏离 Cr2O72- +H2O 2HCrO-4 2H+ +2CrO42- 例： 橙色 黄色 随单体浓度增大,660nm处吸收峰减弱；610nm处吸收峰增强；吸收光谱形状改变。 （二）光学因素 ■ 非单色光（Beer定律要求：入射光为单色光） 照射物质的光经单色器分光后并非真正单色光，而是具有一定波长范围的光，物质对不同波长的光有不同的吸收系数，产生偏离 波长宽度由入射狭缝的宽度和棱镜或光栅的分辨率决定 入射光谱带宽度严重影响吸光系数和吸收光谱形状 结论： 选择较纯单色光（Δλ↓，单色性↑） ■杂散光（不在入射光谱带宽度范围内，与所选波长相距较远的光） 来源：仪器本身缺陷 光学元件污染 影响：使吸收光谱变形，吸光度变值 在末端吸收处出现假峰 ■反射光和散色光（均是入射光谱带宽度内的光直接对T产生影响） 影响：散射和反射使T↓，A↑，吸收光谱变形 消除：一般可用空白对比校正消除 ■非平行光 影响：使光程↑，A↑，吸收光谱变形 (三)透光率的测量误差—ΔT 影响测定结果的相对误差两个因素： T和ΔT ΔT影响因素：仪器噪音 1）暗噪音(与光讯号无关) 2）散粒噪音(随光讯号强弱而变化) 不同T(或A)值浓度测量的相对误差(△T=0.5%) 1）暗噪音——与检测器和放大电路不确切性有关,与光讯号无关 暗噪音(―)与讯号噪音(---)的误差曲线 说明：吸光度测量的适宜读数范围 A值：0.2～0.7 T值：0.20～0.62 当 T= 0.368（A= 0.434）时， 浓度测量的相对误差最小 控制方法：（1）调节被测液的浓度 （2）选择不同厚度的吸收池 0.368 2）讯号噪音——与光讯号有关 表明测量误差较小的范 围一直可延至较高吸光 度区，对测定有利 第二节 紫外-可见分光光度计 一、分光光度计 光源 单色器 检测器 吸收池 讯号处理及显示器 分光光度计主要部件方框示意图 可见分光光度法：以可见光作光源，经单色光器分光后，以所需波长的单色光作入射光，通过测定溶液吸光度来计算被测物质含量的一种方法 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 光源 光源稳定，足够光强度 钨灯 λ：320~3200nm 入射光的光源要求： 氘灯 λ：150~400nm 单色器 组成： 光栅或棱镜、狭逢、准直器 准直镜 棱镜 出光狭缝 入光狭缝 单色器示意图 白光→入光狭缝→准直镜→棱镜或光栅 →色散后的光→准直镜→出光狭缝→ 转动棱镜或光栅 →出光狭缝处获单色光 600 棱镜对光的色散 单色光器 波长越短，传播速度愈慢， 折射率就愈大 狭逢宽度应适中，太宽，单色光纯度差 太窄，光通量小，影响灵敏度 吸收池 吸收池 石英，玻璃 比色皿 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 检测器 光电管 两极间加电压，线路中产生电流 光电流大小与照射光强度成正比 光 光敏阴极 阴极表面放电子 光电管工作线路示意图 入射光 放大器 记录器 + - 阳极 阴极(光敏材料如氧化铯) 高电阻 第十章 紫外-可见分光光度法 紫外-可见分光光度法 第十章 郑 明 彬 紫外-可见分光光度法(UV-vis) 研究物质在紫外-可见光区（200~800nm）分子吸收光谱的分析方法。 UV-vis特点 ■灵敏度高: