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发病仿刺参细菌的分离鉴定和生长特性的研究
第28卷第8期 水 产 科 学 v。1.28No.8
1111笙!旦 兰!!坚曼呈!三!童篁!星釜呈兰 垒!§;!!!!
发病仿刺参细菌的分离鉴定和生长特性的研究
7石晓辉,李太武,陈燕,宋益银,秦玉明,孙爱丽
(宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室,浙江宁波315211)
摘 要:从发病仿刺参中分离到5株菌.分别为痢疾志贺氏菌、有毒威克斯菌、奥斯陆莫拉氏菌、缺陷
短波单胞菌和动物溃疡伯杰氏菌。经革兰氏染色和胞外酶活性剂生理生化特性的研究.确定了痢疾志
贺氏菌、有毒威克斯菌、奥斯陆莫拉氏菌、缺陷短波单胞菌和动物溃疡伯杰氏菌的最佳生长条件分别
是:35℃.pH9.盐质量分数5%;25℃.pH7.盐质量分数5%;25℃。pH7,盐质量分数l%;25℃,pH
7,盐质量分数3%;35℃.pH7,盐质量分数3%。能分解淀粉和蛋白,不能分解酯类。
关键词:仿刺参;细菌;分离鉴定;生长特性
中图分类号:S917.1 文献标识码:A 文章编号:1003-1i11【2009)08-0435-04
件自动读取鉴定结果(由上海水产病害防治中心完
仿刺参(Apostichopusjaponicus)作为餐桌上
的佳肴早已闻名遐迩‘11。据有关资料显示,我国年 成)。
消费海参约1.5×i04t【引,随着海参消费量的增加, 1.2.2胞外酶活性检测‘51
海参养殖量也逐年剧增,这必然使海区的养殖压力 挑取分离纯化得到的细菌单菌落至液体培养
000
加大,海水污染严重,因此,近年来频繁出现腐皮综 基中,28℃,培养24h。液体培养物经10 r/
rain离心10
合症,导致海参大批量死亡嘲。笔者从发病仿刺参 min,取上清液,用直径0.22/am的滤
中分离细菌,对其生长特性进行研究,以期找到刺 膜过滤得到胞外酶产物[6]。
参发病的原因,为进一步解决刺参养殖难题奠定基 胞外酶活性:将牛津杯均匀置于淀粉琼脂培养
础。 基、酪蛋白琼脂培养基、明胶琼脂培养基、吐温琼脂
培养基上,注入250卢l无菌胞外酶产物,35℃,培
1材料与方法
养48h。分别用卢哥氏碘液、10%三氯乙酸、酸性
1-1材料 氯化汞以及10%三氯化铁染色,观测分解圈大小。
试验用刺参取自宁海得水养殖场人工养殖。
以分光光度计测定菌液的0D4∞。值表示仿刺
将采集后的仿刺参样品立即放人装有海水的塑料
参细菌的生长状况。不同培养条件对菌株生长的影
袋中,充纯氧扎口,低温运至实验室。试验所用试
响以盐质量分数、温度、pH值因素进行单因素试验。
剂均为分析纯,购于宁波奥博化学试剂有限公司。
2 结果
培养基为营养琼脂和检测胞外酶活性的各种培养
基。 2.1生理生化反应
1.2方法 从发病溃烂、呈白色絮状的体壁中分离出5株
细菌的分离和革兰氏染色参照文献[4]进行。 菌,经鉴定为痢疾志贺氏菌(Shigelladysenteria)、
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