发病仿刺参细菌的分离鉴定和生长特性的研究.PDFVIP

第28卷第8期 水 产 科 学 v。1．28No．8 1111笙!旦 兰!!坚曼呈!三!童篁!星釜呈兰 垒!§；!!!! 发病仿刺参细菌的分离鉴定和生长特性的研究 7石晓辉，李太武，陈燕，宋益银，秦玉明，孙爱丽 (宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江宁波315211) 摘 要：从发病仿刺参中分离到5株菌．分别为痢疾志贺氏菌、有毒威克斯菌、奥斯陆莫拉氏菌、缺陷 短波单胞菌和动物溃疡伯杰氏菌。经革兰氏染色和胞外酶活性剂生理生化特性的研究．确定了痢疾志 贺氏菌、有毒威克斯菌、奥斯陆莫拉氏菌、缺陷短波单胞菌和动物溃疡伯杰氏菌的最佳生长条件分别 是：35℃．pH9．盐质量分数5％；25℃．pH7．盐质量分数5％；25℃。pH7，盐质量分数l％；25℃，pH 7，盐质量分数3％；35℃．pH7，盐质量分数3％。能分解淀粉和蛋白，不能分解酯类。 关键词：仿刺参；细菌；分离鉴定；生长特性 中图分类号：S917．1 文献标识码：A 文章编号：1003-1i11【2009)08-0435-04 件自动读取鉴定结果(由上海水产病害防治中心完 仿刺参(Apostichopusjaponicus)作为餐桌上 的佳肴早已闻名遐迩‘11。据有关资料显示，我国年 成)。 消费海参约1．5×i04t【引，随着海参消费量的增加， 1．2．2胞外酶活性检测‘51 海参养殖量也逐年剧增，这必然使海区的养殖压力 挑取分离纯化得到的细菌单菌落至液体培养 000 加大，海水污染严重，因此，近年来频繁出现腐皮综 基中，28℃，培养24h。液体培养物经10 r／ rain离心10 合症，导致海参大批量死亡嘲。笔者从发病仿刺参 min，取上清液，用直径0．22／am的滤 中分离细菌，对其生长特性进行研究，以期找到刺 膜过滤得到胞外酶产物[6]。 参发病的原因，为进一步解决刺参养殖难题奠定基 胞外酶活性：将牛津杯均匀置于淀粉琼脂培养 础。 基、酪蛋白琼脂培养基、明胶琼脂培养基、吐温琼脂 培养基上，注入250卢l无菌胞外酶产物，35℃，培 1材料与方法 养48h。分别用卢哥氏碘液、10％三氯乙酸、酸性 1-1材料 氯化汞以及10％三氯化铁染色，观测分解圈大小。 试验用刺参取自宁海得水养殖场人工养殖。 以分光光度计测定菌液的0D4∞。值表示仿刺 将采集后的仿刺参样品立即放人装有海水的塑料 参细菌的生长状况。不同培养条件对菌株生长的影 袋中，充纯氧扎口，低温运至实验室。试验所用试 响以盐质量分数、温度、pH值因素进行单因素试验。 剂均为分析纯，购于宁波奥博化学试剂有限公司。 2 结果 培养基为营养琼脂和检测胞外酶活性的各种培养 基。 2．1生理生化反应 1．2方法 从发病溃烂、呈白色絮状的体壁中分离出5株 细菌的分离和革兰氏染色参照文献[4]进行。 菌，经鉴定为痢疾志贺氏菌(Shigelladysenteria)、