南开大学细胞生物学课件.ppt

如何测定线粒体呼吸链各组分在内膜上的排列分布？ （1）测定各电子传递体的标准氧化还原电位,因为各组分在呼吸链上的排列顺序与其得失电子的趋势有关，电子总是从低氧化还原电位向高氧化还原电位流动，氧化还原电位值愈低的组分失去电子的倾向越大，愈易成为还原剂而处于传递链的前面。 （2）用分离的电子传递体进行体外重组试验。NADH可使NADH 脱氢酶还原，但不能直接使细胞色素b、c、aa3还原。同样，还原型的NADH脱氢酶也不能直接与细胞色素c起作用，必须经过CoQ和细胞色素b和细胞色素c1后才能在与细胞色素c起作用。 （3）利用呼吸链的特殊阻断抑制剂，阻断链中某些特定的电子传递环节。若加入某种抑制剂后，则在阻断环节的负电性侧的电子传递体因不能被氧化而大多处于还原状态；但阻断环节的正电侧，电子传递体因不能被还原而大多处于氧化状态，从此可以推断出各成分间的关系。 （4）最直接的证据是用分光光度计法通过吸收光谱的变化来测定完整线粒体中呼吸链的各个电子传递体的氧化还原状态。当某个电子传递处于还原状态时，以氧化态作对照，就可以用灵敏的分光光度计测出呼吸光谱的变化。测定结果表明，在呼吸链的NADH一端，电子传递体的还原性最强。而在靠近氧的一端，电子传递体aa3几乎全部处于氧化状态。如将O2供给完全处于还原状态的电子传递体时，细胞色素aa3首先被氧化，其次是细胞色素c，再次是细胞色素b,依次往前推，直至使NADH氧化为止。 线粒体和叶绿体蛋白的运送与装配 核基因编码的蛋白质向线粒体跨膜运输转运 ，需在细胞质基质中先合成其前体形式，然后通过转移方式运输到线粒体内。前体蛋白由成熟的形式的蛋白质和N端的一段成为导肽的序列共同组成。导肽内不仅含有识别线粒体的信息，并且有牵引蛋白质通过线粒体膜进行运送的功能。 叶绿体蛋白质的运送与装配与线粒体有很多相似之处。细胞质中合成的叶绿体前体蛋白，在N端也含有一个额外的氨基酸序列称为转运肽，转运肽历经两次水解，一次在基质内，一次在类囊体腔中。定位于基质中的蛋白，其前体蛋白N端的转运肽仅具有导向基质的序列。最后许多运入的蛋白质与叶绿体自身合成蛋白质共同组成复合物，发挥各自的功能。 半自主：线粒体和叶绿体均有自我繁殖所必须的基本成分，有自身的DNA,能自我复制，并编码有一定量遗传信息。具有独立进行转录和翻译的功能。 第八章 细胞核与染色体 3个方面：1.细胞核各个部分（核膜和孔复合体、染色质与染色体、核仁和核基质）的结构与功能；2.染色质与染色体间的互变和染色质结构与基因转录间的关系；3.与细胞核有关的一些常用实验技术。 基本概念 核纤层;核孔复合体;核质蛋白;染色质;核定位信号;核糖核蛋白颗粒;ALU家族;小卫星DNA;微卫星DNA高速泳动族蛋白;亮氨酸拉链;锌指模式;染色体骨架;染色质Loop结构域;着丝粒;端粒;端粒酶;自主复制DNA序列;人工微小染色体;B染色体;核型模式图;负超螺旋;多线染色体;灯刷染色体;随体;核仁周期;DNA酶I超敏感位点;活性染色质;限制性片段长度多态性（RFLP）;种属间印迹;常染色质;异染色质;动粒;核仁组织者区; 细胞核的基本结构及主要功能小结 细胞核主要是由核被膜、染色质、核仁及核基质组成 .是遗传信息储存的场所，在核内进行基因复制、转录和转录初产物的加工，从而控制细胞的遗传与代谢或活动。 核被膜位于间期核的最外层，是细胞核与细胞之间的界膜。由于它的特殊位置决定了他的两方面的功能：天然选择性屏障 染色质是指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构，是间期细胞核遗传物质存在的形式。染色体是指细胞在有丝分裂活减数分裂过程中由染色质聚缩成的棒状结构 核仁是真核细胞间期核中最显著的结构，普遍存在三种组分：纤维中心、致密纤维组分和颗粒组分。主要功能涉及核糖体的生物发生,包括rRNA合成\加工和核糖体亚单位的装配. 在真核细胞的核内还有一个以蛋白质成分为主的网架结构体系，即核基质，这一结构体系与DNA复制、基因表达和染色体包装与构建有密切关系。 核孔复合体的结构及其功能 核孔复合体主要有以下四种结构组分：一胞质环二核质环三辐四拴。 核孔复合体可看作是一种特殊的跨膜运输蛋白复合体，并且是一个双功能、双向性的亲水性核质交换通道。双功能表现在它有两种运输方式：被动运输和主动运输。双向性表现在既介导蛋白质的入核运转，又介导RNA、核糖核蛋白颗粒的出核转运。 试述从DNA到染色体的包装过程 在真核细胞内，DNA与蛋白质等构成染色体的包装过程如下：由直径为2nm的DNA与组蛋白八聚体结合构成核小体，在组蛋白H1的介导下核小体彼此连接形成直径约为10nm的核小体串珠结构，这是染色质包装的一级结构。不过在生活细胞中，染色质很少以这种伸展的串珠状形式存在，而以30nm的