几种食用真菌超氧化物岐化酶提取及活性测定-生物毕业论文开题报告.doc

理工学院 毕业设计(论文)开题报告 题 目：几种食用真菌超氧化物岐化酶的提取及活性测定 学生姓名： 董建峰 学 号： 08L0304102 专 业： 生物科学 指导教师： 李 敏 2012 年 3月 15 日 1．结合毕业设计（论文）课题情况，根据所查阅的文献资料，每人撰写2000字左右的文献综述： 超氧化物歧化酶及应用 1　超氧化物岐化酶的发现和分类地位 超氧物歧化酶(Superoxide Dismutase简称SOD，ECl.15.1.1)是一种新型酶制剂。Mann 和KeilinJ［1］(Hemocupreid),1969年，Mccord和Fridobvich ［2］SOD类型： 超氧化物歧化酶按其所含金属辅基不同可分为三种，第一种是含铜（Cu）锌（Zn）金属辅基的称（Cu.Zn—SOD），最为常见的一种酶，呈绿色，主要存在于机体细胞浆中；第二种是是含锰（Mn）金属辅基的称（Mn—SOD），呈紫色，存在于真核细胞的线粒体和原核细胞内；第三种是含铁（Fe）金属辅基的称（Fe—SOD），呈黄褐色，存在于原核细胞中。SOD的生产方式??? 目前国内已开发的SOD产品绝大分都是Cu/Zn-SOD，它们最早是从动物的血、肝中分离提取的，动物SOD的分离提取技术也较为成熟。人们相继从牛、猪、羊、马等动物红细胞、肌肉、肝脏组织中分离和纯化出SOD。SOD常用的纯化制备方法有离子交换法、疏水色谱、凝胶过滤法和金属螯和亲和层析法等。提取方法主要有以下几个步骤：溶血液制备、选择性热变性、超滤浓缩、丙酮沉淀、柱层析、冷冻干燥［］。但是，由于这种方法不可避免地发生一些交叉感染，过敏性反应等现象，开发研究从植物中提取SOD就显得尤为重要。我国近年来在植物SOD的研究领域有大量相关报道。许平［］、袁艺］、赵文芝［］、余旭亚［］等分别从大蒜、桑叶、沙棘、仙人掌中提取SOD并进行了相关研究，其提取方法主要有分步盐析法、有机溶剂沉淀法、层析柱法等。除了从动植物中提取SOD外，选育SOD高产菌株进行发酵生产也是比较有价值的一种方法［，10］。由于天然SOD来源有限，且具有异体蛋白免疫原性，外源SOD不易被人体接受等缺陷，使之在应用方面受到很大限制。SOD基因工程是广开酶源，降低成本和获得无抗原性的人源SOD的有效途径。与天然SOD相比，SOD的模拟物有着更显著的优点：首先是获取和制备比天然SOD要简单得多，其次，天然SOD作为一种生物大分子，在进入体内时存在着进入细胞能力弱、细胞渗透性差、在血中半衰期短、不能口服、价格昂贵等缺点［］，所以，目前，生物无机化学家们合成和表征了一系列含铜、锰、铁等金属离子的小分子配合物来模拟SOD，期待将来能用小分子模拟化合物代替SOD应用于临床。其中研究最多的含铜络合物是3，5-二异丙基水杨酸铜［Cu(3，5-DIPS)］［］，这是一种低分子量的亲脂性络合物，具有天然Cu/Zn-SOD样活性，可以起到抗炎及减轻由链脲菌素诱导产生的糖尿病。刘京萍等［］合成的铁()-酪氨酸模拟SOD金属酶，分子量比天然酶小得多，与天然SOD活性差距较小，且毒性小，从而大大推进了人工合成具有分子质量较小、稳定性高、毒性较底、活性较高等优点的SOD模拟物的研究工作。由于SOD催化的反应的特异性，科学家们一直努力寻找适合其特性的简便、精确的测活方法，多年来相继建立的多种活性测定方法，一般分为两大类：直接法和间接法。而直接法往往需要操作复杂、价格昂贵的仪器，在一般实验室无法使用，所以多采用间接法［］。, ，作用机理是： SOD + O2- SOD- + O2 SOD + O2- SOD + H2O2 2O2- + 2H+ O2 + H2O2 H2O2 + O2 4 SOD的应用 人体内超氧阴离子自由基如果得不到清除就会引起衰老自身免疫能力下降以及产生一系列病变。目前人们已经开始研究SOD的广泛应用。 4.1 在药用方面 在美国等工业发达国家SOD应用广泛。目前临床上应用主要是用于清除炎症，抗病毒及增强免疫力等，特别是用于内风湿、关节炎及放射性治疗后引起的皮肤炎症SOD在防止癌细胞扩散和作为抗衰老的药物已引起医药界人士的极大兴趣,如即将获得二类新药证书的国产注射用SOD注射液的临床应用(包括抗炎、抗辐射损伤和抗缺血再灌损伤)。 4.2 在食品工业上的应用 目前,SOD及化学修饰SOD在食品工业中的应用日益广泛,远远超过了相应的理论研究水平，SOD在食品工业中也有很多应用。作为保健食品的功效因子或食品营养强化剂： 现已证实,该类保