生物技术在植物病理学中应用.pptVIP

生物技术在植物病理学中的应用 生物技术的概念 在植物病理学中应用的生物技术 生物技术在植物病理学中的应用 什么是生物技术？ 我们的祖先早就在几千年前就已经学会利用发酵、酿酒、制酱、育种等传统生物技术，但是当代概念的生物技术与之有着根本的区别。当代生物技术是应用现代生物科学及某些工程原理，利用生命有机体（从微生物到高级动物）及其组成（含器官组织、细胞、细胞器甚至基因）来发展新产品或新工艺的一种技术体系。 从严格的意义上讲，生物技术是以生命科学为基础，利用生物的特性或功能，设计构建具有预期性状的新物种或新品系，以及与工程原理和技术相结合进行社会生产或为社会服务的综合性技术领域。 从下个世纪人类面临的能源、食品和环境三大危机来看，生物技术具有巨大潜势。 生物技术在植物病理学中的应用 在植物病理学中应用的生物技术 组织培养脱毒技术 单克隆抗体技术 转基因抗病植物 组织培养脱毒技术基本程序 无菌条件下取茎尖或根尖0.5mm分生组织，至培养基上培养成试管苗 ELISA检测是否带毒 将无毒苗切段快繁 经练苗后移栽防虫网室内 长成后收集微型薯 组织培养脱毒技术 马铃薯组织培养脱毒8个技术要点 茎尖培养试管苗 试管苗病毒检测 试管苗的切段快繁 培养瓶选择合适的封口塑料 改善光质条件 注意培养室温度控制和经常消毒 选择生长健壮的脱毒苗作为扩繁材料 使用B9培养壮苗 马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之一 茎尖培养试管苗 取健康薯在室内催芽（38℃for 14d），无菌条件下剥取带1-2个叶原基的生长点，接种到培养基上，培养温度21-25 ℃，200Lx。 培养基配方：MS+6-苄基腺嘌呤（6-BA）0.05mg/L+萘乙酸（NAA）0.1mg/L+赤霉素（GA3）0.1mg/L+3%蔗糖 植物组织培养流程 马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之二 试管苗病毒检测 聚丙烯凝胶电泳法-检测纺锤块茎类病毒 酶联免疫吸附测定法-检测PVX、PVY等病毒 指示植物接种法-辅助方法 马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之三 试管苗的切段快繁 采用简化的MS培养基 成分：大量元素、微量元素、铁盐、3%食用白糖、琼脂和自来水。 该培养基的优点：6-8d即可生根，叶芽萌发率高，植株健壮。 马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之四 培养瓶选择合适的封口塑料-聚丙烯制成的耐高压盖子 马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之四 培养瓶选择合适的封口塑料-聚丙烯制成的耐高压盖子 马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之五 改善光质条件 尽量利用散射光，即将培养室建成玻璃温室状 马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之六 注意培养室温度控制和经常消毒 室温20-25℃为宜，26 ℃顶部易烧苗，33 ℃瓶苗停止生长。 培养室经常用福尔马林和高锰酸钾熏蒸消毒，每7d一次。 马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之七 选择生长健壮的脱毒苗作为扩繁材料 健壮的试管苗转接后，生长整齐健壮，繁殖效率高，可形成良性循环。 马铃薯组织培养脱毒8个技术要点之八 使用B9培养壮苗 脱毒苗移栽前的最后一次转接，可在MS简化培养基中加入生长延缓剂B910-15mg/L，加B9的脱毒苗生长健壮，节间短，叶色深绿，移栽成活率高。 马铃薯组培苗的练苗移栽 试管苗从无菌到光、温、湿稳定的环境进入自然环境，必须进行炼苗。 一般移植前，先将培养容器打开，于室内自然光照下放3天，然后取出小苗，用自来水把根系上的营养基冲洗干净，再栽入已准备好的基质中，基质使用前最好消毒。 移栽前要适当遮荫，保持较高的空气湿度。 马铃薯组织培养脱毒苗移栽到温室 马铃薯组织培养脱毒生产的微型薯 单克隆抗体技术 免疫反应原理 当动物体受抗原刺激后可产生抗体。抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇，各种抗原分子具有很多抗原决定簇，因此，免疫动物所产生的抗体实为多种抗体的混合物。用这种传统方法制备抗体效率低、产量有限。此外，要把这些不同的抗体分开也极困难。 单克隆抗体技术的出现，是免疫学领域的重大突破。 单克隆抗体技术 单克隆抗体的基本概念 抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。 动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞产生抗体。 如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的