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牛奶中体细胞数及检测

* 荧光光电计数法 操作步骤 原理 样品中加入甲醛溶液固定体细胞,加入乳化剂电解质混合液,将包含体细胞的脂肪球加热破碎,体细胞经过的狭缝时,由阻抗增值产生的电压脉冲数记录,读出体细胞数。 试剂 固定液:0.02 g伊红Y与9.40 mL35%~40%甲醛溶液混合,用水溶解后定容至100mL,混匀后用砂芯漏斗过滤,常温保存。 乳化剂电解质混合液:125 mL 95%乙醇与20.0 mL曲拉通X-100完全混匀,加入885 mL 0.09 g/LNaCl溶液,混匀后用砂芯漏斗过滤,常温保存。 以上试剂也可使用仪器专用的试剂。 * 电子粒子体细胞计数法 * 电子粒子计数法 操作步骤 体细胞检测注意事项 样品的保存 样品采集后在2~6℃条件下保存,若6h内无法完成检测则应添加防腐剂,防止样品变质。 * 防腐剂种类 5℃保存期限(天) 溴硝丙二醇0.02% 5 叠氮醇 5 重铬酸钾0.2% 12 叠氮化钠0.02% 2 硼酸0.6% 2 小结 CMT与WMT CMT法 简单、快速,特别适用牛场现场测定。 WMT法 SCC是测定数,相对准确。但方法相对繁琐。 标准显微镜法与荧光显微镜法 标准显微镜法 直接、可靠,许多国家列为标准方法。 荧光显微镜法 背景更清晰,易于消除干扰。 荧光光电体细胞仪法与电子粒子体细胞仪法 两种方法不分伯仲,准确快速,适合于批量样品测定。但荧光光电体细胞计数法干扰少。 建议:尽快建立牛奶中体细胞数的标准方法,将牛奶中体细胞数纳入国家的监控中。 * * 谢谢! * * * * * * * * Ruminant Nutrition Lab, IAS-CAAS National Milk Quality Center (National MQC) Ruminant Nutrition Lab, IAS-CAAS National Milk Quality Center (National MQC) Jia-Qi WANG 牛奶中体细胞数及检测方法 主要内容 牛奶中的体细胞数 牛奶中体细胞数与乳房炎 牛奶中体细胞数监控—DHI 牛奶中体细胞数的检测方法 * 一、牛奶中的体细胞数 牛奶中的体细胞数 Somatic Cell Count, 简称SCC。 是指每毫升牛奶中的体细胞数。主要由白细胞(巨噬细胞、淋巴细胞、多形核嗜中性白细胞)和少量的乳腺组织上皮细胞组成。 大约93% ~99%的细胞是白细胞。 * SCC的产生机制 * SCC的意义 反映奶牛乳房健康状况 正常情况下,牛乳中SCC为20 ~40 万个/毫升。 影响产奶量* * 陆静,董德宽. 牛奶中高体细胞数反应了什么问题. 上海奶牛, 1998, 2: 21. * 体细胞数(万个/mL) 奶产量损失 SCC15 0 15≤SCC20 产奶量×1.5/98.5 25≤SCC40 产奶量×3.5/96.5 40≤SCC110 产奶量×7.5/92.5 110≤SCC300 产奶量×12.5/87.5 SCC300 产奶量×17.5/82.5 * SCC增高对牛奶质量的影响 影响牛奶SCC的因素 * 关于牛奶中SCC的规定 随着国际乳制品贸易的增加,发达国家和地区对体细胞数制定了严格标准。 * 国家 原奶SCC上限(万个/mL) 新西兰 40 澳大利亚 40 欧盟 40 加拿大 50 美国 75 SCC越低越好? * 体细胞数不应低于免疫系统能够迅速反应有效抵抗病毒的程度,当感染发生时,迅速由血液转移至乳房,进行免疫。 二、体细胞数与奶牛乳房炎 乳房炎 奶牛乳房受到病原微生物感染或物理、化学等致病因子的刺激引起乳腺发炎的疾病。 种类 急性乳房炎 慢性乳房炎 隐性乳房炎 发病率高达31%~51%,且隐性乳房炎比例极高。 * * 乳房炎临床表现及诊断 SCC与乳房炎关系 SCC增高意味着乳房炎的发生 * 体细胞数(万个/mL) 乳房炎判断 50 无炎症 50~100 隐性乳房炎 100~200 乳房炎 200 严重乳房炎 预防乳房炎,控制SCC 环境卫生 牛场 牛舍 牛床 科学饲养 加强运动 避免机械损伤 日粮营养平衡 围产期护理 牛群健康 防疫 养护 及时治疗 隔离病牛 淘汰慢性感染牛 挤奶管理 规范

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