希森美康标准操作规程(参考).docx

1. 分析参数和方法学名称Sysmex XS 提供 24 项参数的结果，各检测参数和方法见表 1。表 1. Sysmex XS 各检测参数和方法参数首字母缩写检测方法白细胞WBC流式细胞计数红细胞RBC鞘流DC 检测方法血红蛋白HGBSLS 血红蛋白检测法红细胞比积HCTRBC 累积脉冲高度检测法平均红细胞体积MCV由RBC 和HCT 算出平均红细胞血红蛋白量MCH由RBC 和HGB 算出平均红细胞血红蛋白浓度MCHC由HCT 和HGB 算出血小板PLT鞘流DC 检测方法中性粒细胞百分比NEUT%流式细胞计数淋巴细胞百分比LYMPH%单核细胞百分比MONO%嗜酸性粒细胞百分比EO%嗜碱性粒细胞百分比BASO%中性粒细胞数NEUT#淋巴细胞数LYMPH#单核细胞数MONO#嗜酸性粒细胞数EO#嗜碱性粒细胞数BASO#红细胞分布宽度－标准差RDW-SD根据红细胞直方图算出红细胞分布宽度－变异系数RDW-CV根据红细胞直方图算出血小板分布宽度PDW根据血小板直方图算出平均血小板体积MPV根据血小板直方图和PLT算出大血小板比率P-LCR根据血小板直方图算出血小板压积PCT根据血小板直方图算出2. 原理2.1.鞘流 DC 检测方法（RBC、PLT、HCT）在该检测器内，样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。将稀释后的样品由样品喷嘴推入锥形室以后，由前鞘流内的试剂包裹通过小孔的中心。通过小孔以后，经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。这样就可以防止该区域的血细胞回流，并防止产生假性血小板脉冲。鞘流方法改善了血液计数的准确性和重现性。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔，所以也可防止产生异常血细胞脉冲。2.2.使用半导体激光器的流式细胞计数方法使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子的物理和化学性质。使用流式细胞计数法只需很少的样品就可对这些细胞和粒子进行检测。一个血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比，并进行染色。然后将该样品送入流动池中。这种鞘流装置改进了细胞计数的准确性和重现性。同时，由于血细胞颗粒成行通过该流动池的中心，故而防止产生异常血液脉冲并可减少流动池的污染。一个半导体激光束通过该流动池照射到血细胞上。前向散射光由光电二极管接收，侧向散射光和侧向荧光则由光电倍增管接收。光信号被转化为电脉冲，从而可以得到有关血液细胞的信息。2.2.1. 前向散射光和侧向散射光当一束激光照射到血细胞颗粒上时，就产生光散射。XS 检测前向散射光和侧向散射光，前向散射光的强度反映血液细胞体积大小。侧向散射光的强度反映细胞内部（如细胞核的体积大小）的信息。2.2.2. 侧向荧光当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时，就产生比入射光波长更长的光。随着染色集团浓度的增加，荧光强度也增加。通过测量荧光强度，可以得到有关血细胞染色的信息，XS 检测侧向荧光。2.3.SLS-血红蛋白测定法在稀释的血液中加入溶血素，红细胞中的血红蛋白被释放出来。血红蛋白在月桂洗硫酸钠的作用下，二价铁转变成三价铁，并与月桂洗硫酸钠结合形成 SLS-Hb，SLS-Hb 进入血红蛋白检测系统。测定 SLS-Hb 在 555nm 波长下的吸光度值，并通过与加入样品前稀释液的吸光度进行对比进行计算。2.4.计算（红细胞指数）红细胞指数（MCV、MCH 和 MCHC）通过 RBC 计数（RBC）、Hb 浓度（HGB）和红细胞压积（HCT）的值计算出。计算公式如下：MCV（fl）＝HCT×1015 RBC/LMCH (pg)＝HGB(g/L)×1012 RBC/LMCHC(g/L)＝HGB(g/L) HCT3. 标本准备用真空采血管（紫色盖头）采集 EDTA-K2抗凝的静脉血。采血后立即与抗凝剂混匀，在试管外壁贴上单据号等病人信息或检验联号后，放置室温立即送检。穿刺时须防止穿刺针刺扎采血员，以避免血液中传染性病原如肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒等以及血液中未知的可致病成分污染采血员。标本在室温下最多保留 4 小时。不能在 4 小时内检测的标本，放置于冷藏冰箱（2℃~8℃）中保存，8 小时内有效，使用前从冰箱中取出回复室温后检测。4. 试验器材乳胶手套、试管架5. 仪器Sysmex XS 全自动血液分析仪6. 试剂6.1.稀释液（CELLPACK）6.1.1. 试剂品牌：Sysmex代码：PK-30L包装规格：20L6.1.2. 试剂成份：氯化钠6.38g/L硼酸1.00g/L 四硼酸纳0.20g/LEDTA-K20.20g/L6.1.3. 储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为 15~30℃。6.1.4. 使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为 60 天。6.1.5. 安全事项：在使用前确认是否有污染或颜色变化，一经发现，请速更换。如出现冻结