海绵状脑病原理介绍.pptVIP

6.3.2 光谱分析 目前光谱分析可分多光谱紫外荧光分析(MUFS) 和共聚焦双色荧光相关波谱分析(FCS)两种。光谱分析方法可直接检测PrP sc, 不需要蛋白酶K预处理。多光谱紫外荧光分析不需要借助于PK处理及特异性抗体就能直接检测。 共聚焦双色荧光相关波谱分析可检测溶液中荧光标记的单分子, 待检分子发射的荧光光子被激光识别后, 聚在一个点上, 在单光子检测上成像。 6.3.3 高效液相色谱 利用高效液相色谱检测与PrPsc 相关的疾病。该法主要是利用高效液相色谱检测prion 蛋白基因(PRNP)上某些与PrPsc相关的位点(如129位点) ,从而达到检测PrP sc的目的。 * (Bovine Spongiforn Encephalopathy, BSE) 1、前言 牛海绵状脑病(Bovine Spongiforn Encephalopathy, BSE)俗称疯牛病, 它是一种类似脑病毒感染的传染病, 以潜伏期长,病情逐渐加重, 终归死亡为特征, 本病死亡率很高。首先发现的人类朊病毒疾病是库鲁病, 在动物中最早发现的是羊瘙痒病。 1985 年4月发现, 1986 年11 月将该病定名为BSE。 动物及人的各种朊病毒病: 牛 疯牛病 羊 羊瘙痒症 貂 貂传染性脑病 猫 猫海绵状脑病 偶蹄动物 偶蹄动物脑病 人 克雅病 人 新变异型克雅病 人 致死性家族遗传性失眠症 人 格施谢三症 由于此病迄今尚无法治疗, 又有传染给人之可能性, 使人得一种病死率极高的中枢神经退化病———新型克雅病(New V arientCreutzfeldt-Jakob disease, NV -CJD ), 因此, 疯牛病不仅对经济造成严重损失, 而且引起了全球对疯牛病的恐慌。 2、病原学 朊病毒( Prion, 有人译为朊粒或朊蛋白) 是一种特殊传染因子, 它不同于一般病毒, 也不同于类病毒, 它没有核酸, 而是一种特殊的糖蛋白。用PrP 代表( Pr 代表Prion, P 代表Protein) 。 PrP PrPc:是正常细胞具有的，对蛋白酶敏感，易被其消化降解， 存在于细胞表面，无感染性。 PrPsc:当结构异常时，就成为另一类有致病性PrP，对蛋白酶K有一定抵抗力。 prpc与prpsc的对比: prpc prpsc 氨基酸结构 相同,a-螺旋较多 相同,β-片层较多 核酸 无 无 蛋白酶 无抵抗力 有抵抗力 致病性 无 有抵抗力 生物学特性: 朊病毒是一种有两种结构型, 一种是prpc, 正常情况下存在于细胞表面, 无感染性, 可被蛋白酶K消化降解, 可溶于去垢剂。当蛋白结构由α螺旋变构成β片层结构时, 具有了致病性, 称prpsc, 而不被蛋白酶分解, 不溶于去垢剂。 最近, 美国和冰岛的科学家对BSE 蔓延又有新解释, 他们认为, BSE 的传播与生活在农场干草中的螨虫有关。 4、临床症状 BSE 和痒病在临诊上有许多相似的地方, 最大的区别是BSE 很少出现搔痒症状。神经症状可分为三个类型。 一型 通常出现恐惧、暴怒和神经质 二型 3% 的病例姿势和运动异常,后肢共济失调、颤抖和倒下 三型 90% 的病例有感觉异常, 触觉和听觉减退 惊恐不安，有攻击性 恐惧不安，狂奔 5、病理变化 牛海绵状脑病无肉眼可见的病理变化, 也无生物学和血液学异常变化。典型的组织病理学和分子学变化都集中在中枢神经系统。牛海绵状脑病有三个典型的非炎性病理变化: 病理变化 ( 1) 星型细胞肥大常伴随于空泡的形成 (2)牛海绵状脑病存在淀粉样病变, 但不 多见 (3) 出现双边对称的神经空泡 神经纤维网空泡 核浓缩 运动神经障碍 脑组织 分子病理学变化: 除了痒病家族应有特征性组织病理变化外, 牛脑组织提取液中还含有大量的异常纤维( SAF) , 可用电镜负染技术观察到, 这对牛感染牛海绵状脑病的确诊非常重要。 6、诊断 机体感染BSE后既无任何炎症, 也不产生免疫应答, 所以该病至今尚无血清学诊断方法, 病牛的血液生化指标也无显著异常。因此本病的诊断主要依据流行病学、临床症状和组织病理学进行初诊, 通过死后脑组织采样, 检测SAF以确诊BSE。 6.1 　病理学方法 病理组织解剖及动物传递传染实验多用于发病后期及死后诊断，用任何新方法做出的阳性结果均需用此方法作以最终判定。 6. 1.1 组织病理学方法 是对BSE 感染的脑超薄切片进行电子显微镜观察，从而确诊BSE 疾病的一种方法。但这种检查一般是在疾病发展的后期进行，难以实现BSE 的活体检测。 6.1.2 动物试验 动物试验