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Stat3 抑制剂联合治疗逆转卵巢癌顺铂耐药摘要[目的]卵巢癌是女性生殖系统死亡率最高的恶性肿瘤，不易早期诊断，出现临床症状时，多已发展至中晚期，肿瘤已发生扩散转移。卵巢癌治疗以肿瘤细胞减灭术辅以铂类等一线化疗药物消灭残余病灶为主，但化疗耐药成为阻碍卵巢癌治疗的难题，埋下卵巢癌复发转移的危机。近年来许多研究表明，在多种肿瘤中Stat3信号通路均被激活，Stat3基因的活化与肿瘤的侵袭转移、化疗耐药密切相关，本研究旨在探讨stat3 的活化与卵巢癌化疗顺铂耐药的关系及stat3 小分子抑制剂在卵巢癌治疗中的应用。[方法]外源性IL-6 活化卵巢癌细胞内Stat3 信号通路，SiRNA靶向封闭细胞内Stat3 的表达及其信号通路的传导，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测顺铂处理后卵巢癌细胞增值率。流式细胞术检测不同浓度时间下，顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡情况。蛋白免疫印迹法检测不同处理组卵巢癌细胞中Stat3，p-stat3 的表达情况，抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-Xl及Survivin的蛋白表达水平。采用免疫组织化学法检测23例卵巢癌临床标本中stat3 与p-stat3 的蛋白表达水平，并分析它们与临床顺铂化疗敏感性的关系。建立人卵巢癌原位移植动物模型，荷瘤小鼠随机分为4 组：（1）予PBS；（2）Stattic；（3）顺铂；（4）Sattic+顺铂，测量肿瘤体积变化，绘制小鼠生存时间，研究stat3小分子抑制剂对卵巢癌顺铂治疗的影响。[结果]与顺铂敏感卵巢癌细胞OV2008 相比，顺铂耐药卵巢癌细胞C13 中p-Stat3 表达水平明显升高，总Stat3表达水平无明显差别。外源性IL-6激活Stat3信号通路后，顺铂处理的两种卵巢癌细胞株凋亡率均明显下降，而Si RNA靶向封闭Stat3 基因后，顺铂作用的卵巢癌细胞株凋亡率显著升高。临床标本中顺铂耐药患者的肿瘤组织中p-Stat3表达水平升高。小分子抑制剂Stattic与顺铂联用后，卵巢癌细胞内p-Stat3表达水平降低，抗凋亡基因Bcl-2、Bcl-Xl 及Survivin 的蛋白表达水平降低，Caspase3 凋亡信号通路相关蛋白表达升高，卵巢癌细胞对顺铂的敏感性增强，凋亡率明显升高。卵巢癌原位移植动物模型中，与其余3 组相比，Stattic与顺铂联用后肿瘤体积缩小最明显，小鼠生存时间最长，差异均具有统计学意义。[结论]卵巢癌细胞对顺铂产生耐药性与细胞内Stat3 基因被激活密切相关，体外实验和体内实验中，Stat3 小分子抑制剂Stattic均能有效抑制Stat3 的活性，增强卵巢癌对顺铂的敏感性。Stat3 作为靶点，将成为解决卵巢癌耐药问题的关键所在。[关键词]Stat3；顺铂；卵巢癌；耐药；抑制剂AbrogationofconstitutiveStat3activitycircumventscisplatinresistantovariancancerAbstract[Objective]Ovariancanceristhethirdmostlethalcanceramongwomenandtheleading causeofgynecologiccancerdeaths.Currently,thestandardtherapyforpatientswith advancedovariancancerremainscytoreductivesurgeryfollowedbytheadministrationof systematicchemotherapy,whilethediseaserecursinalargemajorityofpatientsand becomesincreasinglycisplatinresistantRecently,numerousstudieshavedemonstrated aberrant STAT3 signalinginawide variety of human tumors, constitutive activation ofSTAT3relatedtoinvasionandmetastasiscontributesignificantlytochemoresistance. ThepresentstudyinvestigatestheroleofStat3incisplatinresistantovariancancercells andtheeffectofStattic,aneffectivesmallmoleculeinhibitorofStat3,onStat3activation, thustakingonanincreasinglyimportantstrategicrole,mostlyforthe