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阿魏酸钠对高糖环境下人视网膜内皮细胞的增殖作用以及VEGF表达的影响硕士研究生：程启琳导师：李红教授中文摘要目的研究不同浓度的阿魏酸钠(sodium ferulate, SF)对体外高糖环境下培养的人视网膜血管内皮细胞(human retinal capillaryendothelial cells, HRCEC)的增殖以及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)表达的影响。从而为糖尿病视网膜病变早期的预防及治疗提供新的研究思路以及理论依据。方法眼科手术所提取的HRCECs进行体外培养，通过免疫细胞化学方法检测F Ⅷr-Ag鉴定培养的HRCEC。取第3～4代生长良好的细胞进行实验,实验设置分组为空白对照组、低糖对照组、高糖对照组、高糖+不同浓度阿魏酸(1mg/L，2mg/L，3mg/L，4mg/L)组,用噻唑蓝比色法(MTT)检测48h后不同质量浓度的阿魏酸钠对体外高糖环境下HRCECs增殖作用，通过免疫细胞化学法观察细胞VEGF的表达情况。结果1、免疫细胞化学检测体外原代培养的HRCEC，Ⅷ因子相关抗原抗体染色，呈阳性染色；2、MTT比色法结果显示：用1mg/L，2mg/L，3mg/L，4mg/L的阿魏酸钠作用于原代培养的高糖环境下HRCECs48h，细胞增殖抑制率分别为46.97%61.55%76.91%83.47%。在相同的时间作用条件下，一定质量浓度范围的阿魏酸钠对高糖环境下HRCECs的增殖具有抑制作用（P 0.05），随着药物浓度的增加，细胞存活率反而逐渐下降，抑制率逐渐提高。低糖对照组与高糖对照组相比较结果无明显统计学意义（P =0.0680.05）。3、免疫化学法检测显示：低糖对照组、高糖对照组与不同浓度的阿魏酸钠（1mg/L，2mg/L，4mg/L）作用于HRCEC 48h后化学背景灰度值与阳性灰度值之差分别为28.27±1.62，93.67±0.81，72.67±2.89，53.73±1.70，30.93±3.72。通过48h后加药组和高糖对照组相比，VEGF表达明显下降，差异性明显，且均有统计学意义(均为P0.05)，具有质量浓度依赖性。与低糖对照组相比，高糖对照组VEGF的表达明显增加2(P0.05)。结论1、阿魏酸钠对体外环高糖境下培养的HRCECs的增殖具有抑制作用，且呈质量浓度依赖性，并能诱导细胞凋亡。2、阿魏酸钠可以下调HRCECs 在体外高糖环境下培养的VEGF的表达，呈现质量浓度依赖性；3、阿魏酸钠抑制视网膜新生血管可能是通过下调HRCECs 中VEGF表达。关键词：阿魏酸钠；人视网膜血管内皮细胞；VEGF；视网膜新生血管；增殖3EffectsofsodiumferulateonproliferationandexpressionofVEGFofHumanretinalcapillaryendothelialcellsinhighglucoseenvironmentAbstractObjective：Tostudytheeffectsofdifferentconcentrationsofsodiumferulate(SF) onhumanretinalcapillaryendothelialcells(HRCEC)proliferationandvascular endothelialgrowthfactor(VEGF)expressingwithdifferentconcentrationsinvitro conditionsofhighglucose.Thenewresearchideasandtheoreticalbasisforthe prevention and treatmentof diabeticretinopathyearly.Methods：Theextractedfrom corneal transplantationHRSEC andculturedin vitro.andidentifiedbythepositiveexpressionofFⅧr-Agusing immunocytochemistry. the 3- 4rd generation were taken into experiment. Theexperimental weredivided into blank controlgroup, highglucosecontrol ,lowglucose controlgroup,groupandhighglucose+different concentrationofSF (1mg/L，2mg/L，4mg/L) group . The result of SF with differen