00 生物化学实验--总论.docVIP

总论 生物化学是一门重要的基础医学必修课，生物化学实验是生物化学教学的重要组成部分，医学生的动手能力、综合分析能力和创新能力的培养主要依靠实验教学来完成。另外， 随着生物化学的迅速发展，生物化学实验方法和技术也不断更新，已成为基础医学和临床医学应用广泛的重要实验手段之一。因此，对生物化学实验方法和技术的掌握已成为医学领域在新的高度和水平揭示生命奥秘的共同需求。 　一、生物化学实验的目的 　　1 ．学习生物化学实验的设计原理，掌握基本实验方法与实验技术。 　　2 ．验证部分理论课的内容，巩固加深对生物化学理论的认知。 　　3 ．培养学生的动手能力、综合分析能力和创新能力。 　二、生物化学实验的基本内容 　（一）生物分子（主要是生物大分子）的制备 　生物大分子的制备过程如下： 　　1 ．材料的选择和预处理 　　考虑目的、来源、工艺和成本。 　　2 ．细胞的破碎和细胞器的分离 　　（ 1 ）破碎细胞可采用机械法（捣碎、匀浆、研磨）、物理法（反复冷融、冷热交替、超声波、加压破碎）或化学生物法（自融、融菌酶处理、表面活性剂）。 　　（ 2 ）分离细胞器可采用在适当介质中进行差速离心的方法。 　　3 ．提取（抽提、萃取） 　　经过处理和破碎了的细胞置于一定条件和溶剂中，让被提取的生物分子充分释放出来。 　　4 ．分离纯化 　　从细胞中提取出来的生物分子还是不纯的，常含有多种同类或者异类物质，必须进一步纯化才能获得纯品。分离纯化的依据和方法包括 ① 依据分子大小和形状不同，可采用差速离心、超滤、分子筛或透析等方法； ② 依据溶解度不同，可采用盐析、溶剂抽提、层析、逆流分配或结晶等方法； ③ 依据分子表面电荷不同，可采用电泳、电渗析、等电沉淀、离子交换或吸附层析等方法； ④ 依据生物学功能专一性不同，可采用亲和层析来分离、纯化某一物质。 　（二）对生物大分子进行定性、定量分析（生化分析） 　　对生物大分子进行定性、定量分析的常用方法有： 　　1 ．一般化学操作 　　包括液体的转移、混匀、过滤、蒸馏、加热、干燥、研磨和称量等。 　　2 ．常用定性、定量分析的基本技术 　　包括电泳技术、层析技术、比色分析技术和离心技术等。随着分子生物学的迅猛发展，生物大分子的定性、定量分析还常采用分子杂交技术（印迹技术）、聚合酶链反应技术（ PCR ）、基因芯片技术、蛋白质芯片技术等。有些物质的定性、定量分析还要采用一些其它技术，如放射性同位素技术、免疫化学技术、测压技术、电子显微镜技术等。 　（三）对生物大分子的加工和改造 　　对生物大分子进行加工和改造常用的方法有基因工程、蛋白质工程、酶工程和发酵工程。这一部分对于 药学类专业的 专科学生不作要求。 　三、生物化学实验课的要求 　　为了达到生物化学实验的目的，要求学生认真对待每一个实验，做到实验前预习、实验中严谨、实验后认真完成实验报告。具体要求如下： 　　1 ．实验前的要求 　　认真预习，熟悉本次实验的目的、原理、基本操作步骤、注意事项，懂得每一操作步骤的意义和了解所用仪器的使用方法，否则不应该开始实验。 　　2 ．实验过程中要求 　　听从教师的指导，遵守实验室规则，严肃认真地按操作规程进行实验，合理安排实验器材和时间，细致观察，并把观察到的现象以及实验结果和数据及时、如实地记录在实验记录本上，文字要简练、准确。 　　3 ．实验后的要求 　　完成实验后，做好清理，并认真完成实验报告。经教师检查同意，方可离开实验室。 　四、生物化学实验报告的书写规则 　　1 ．报告格式要求 　　实验报告封面要求注明实验者所属系别、班级、学号、姓名、同组者。每次实验报告要求写明实验题目、实验日期、实验目的、实验原理、实验记录、实验结果、结果分析及思考题解答。 　　2 ．报告内容要求 　　要求真实、完整、原始、条理。如实记录观察到的现象和结果，真正反映客观事实；内容要完整，不要丢三落四，不要忽视偶然现象；必须记录原始的操作、数据和现象，不能主观捏造；报告内容的叙述要条理、清晰、字迹工整。 　五、生物化学实验室规则 　　1 ．进入实验室做实验必须穿白色工作衣。 　　2 ．保持实验室肃静 　　每个同学都应自觉遵守课堂纪律，维护课堂秩序，不迟到，不早退，不大声喧哗，严禁用试剂、器材和动物等开玩笑。 　　3 ．保持实验室整洁 　　实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐。公用试剂用完后，应立即盖严放回原处。勿使试剂、药品洒在实验台面和地上。可将废液倒入水槽内，同时放水冲走。强酸、强碱溶液必须先用水稀释，再倒入水槽内放水冲走。废纸屑及其他固体废物和带渣滓的废物倒入废品缸内，不得倒入水槽或到处乱扔。实验完毕，将仪器洗净放好，并将实验台面擦拭干净，才能离开