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攀援天门冬染色体核型分析 　　摘要：试验对攀援天门冬体细胞染色体进行了核型分析，结果表明，其染色体数目为２ｎ＝２０，核型公式为ｋ＝２０＝２Ｍ＋１４ｍ＋４ｓｍ，核型为“１Ｂ”型。 　　关键词：攀援天门冬；染色体；核型分析 　　中图分类号：Ｑ９４９．７１＋８．２３；Ｑ３４３．２＋１文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11403－0536-02 　　 　　Analysis of the Chromosome of Asparagus brachyphyllus Turcz. 　　ＺＨＡＯ Ｌｉ－ｐｉｎｇ1，2，ＺＨＡＮＧ Ｈａｎ－ｊｉｅ1 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ａｎｄ ｋａｒｙｏｔｙｐｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｏｆ Ａｓｐａｒａｇｕｓ ｂｒａｃｈｙｐｈｙｌｌｕｓ Ｔｕｒｃｚ． ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｅｓ ｉｓ ２ｎ＝２０ ａｎｄ ｉｔｓ ｋａｒｙｏｔｙｐｅ ｆｏｒｍｕｌａ ｉｓ Ｋ＝２０＝２Ｍ＋１４ｍ＋４ｓｍ，ｂｅｌｏｎｇｓ ｔｏ ｔｙｐｅ “１Ｂ” ｏｆ Ｓｔｅｂｂｉｎｓ ｋａｒｙｏｔｙｐｅ ｓｙｍｍｅｔｒｙ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ａｓｐａｒａｇｕｓ ｂｒａｃｈｙｐｈｙｌｌｕｓ Ｔｕｒｃｚ．； ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｎｕｍｂｅｒ； karyotype analysis 　　 　　攀援天门冬又名海滨天冬，为百合科天门冬属攀援植物，块根肉质，圆柱状，叶状枝具软骨质齿。分布于我国吉林、辽宁、河北、山西、陕西和宁夏［１］等地种子实生繁殖。 　　攀援天门冬耐旱，又耐盐碱，且枝型曲折美观，不仅可用作盆栽观赏，还是干旱、盐碱地区良好的绿化地被植物；另外，它还可能具有较大的药用开发价值。近些年来，国内对攀援天门冬的研究鲜有报道，为此，我们分析了攀援天门冬体细胞染色体数目及核型类型，以期为攀援天门冬的细胞分类学、引育种及其开发利用提供参考依据。 　　１材料与方法 　　１．１材料 　　试验材料采自山东省无棣县大口河贝沙滩地。 　　１．２方法 　　１．２．１试验方法选取攀援天门冬饱满的种子放在培养皿中，置于２４的恒温箱中发芽３～４ ｄ，待胚根长至０．３～０．５ ｃｍ时于上午９00～１０00时切取胚根；在室温下用０．１％的秋水仙素和０．００２ ｍｏｌ／Ｌ的８－羟基喹啉溶液混合液对攀援天门冬根尖进行预处理４ ｈ，取出并用去离子水冲洗后，再用卡诺氏固定液固定１８～２４ ｈ，放入预热至６０的１ ｍｏｌ／Ｌ 的ＨＣｌ溶液中解离１０～２０ ｍｉｎ，常规方法压片，改良石炭酸品红染色。 　　选取具有染色体分散良好、核相清晰、符合分析要求的片子，冰冻法揭片，干燥后用中性树胶封片，然后进行显微摄影及分析。 　　用ＯＬＹＭＰＵＳ显微镜对染色体和标有尺寸的镜台测微尺在相同的放大倍数下进行拍照，然后将染色体和镜台测微尺的照片放大成相同尺寸打印，再用剪刀剪贴、目测、配对、排队，随后对染色体进行数据测量。 　　１．２．２计算方法细胞核型分析按李懋学等［２，３］ 确定的标准，并参照Ｌｅｖａｎ等［４］的方法根据染色体臂比来确定着丝粒位置；参照Ｓｔｅｂｂｉｎｓ的核型分类方法［５］，按核型中最长染色体与最短染色体之比及臂比大于２的染色体所占的比例来确定染色体核型对称程度。 　　２结果与分析 　　２．１攀援天门冬染色体数目及形态 　　选择３０个染色体数目清晰的分裂中期细胞对染色体进行计数，结果表明攀援天门冬细胞染色体数均为２０条，未发现非倍性体细胞，因此攀援天门冬染色体数目为２ｎ＝２０。同时根据染色体相对长度、臂比等进行染色体由长到短同源染色体重新编号，按照着丝粒排列在同一水平线上，短臂在上，长臂在下的原则由左至右排列，即得染色体核型图。 　　２．２染色体长度组成 　　取５个分散良好，着丝粒清晰的中期细胞染色体测量，取其平均值后其核型分析结果见表１。结果表明，攀援天门冬２０条染色体可配对成１０对，其中第９对染色体为正中部着丝粒；第2、６对为近中部着丝粒；第１、3、４、５、７、８、１０对为中部着丝粒。全组染色体总长度为１０．８９５ μｍ，全组染色体平均长度为０．５４５ μｍ，绝对长度变化范围为０．７００～１．４３５ μｍ，臂比值变化范围为１．００～１．７7。 　　２．３染色体核型模式图 　　核型模式图用绘图纸和坐标纸绘制。坐标纸放在绘图纸下作为标记，横坐标为染色体序号，纵坐标为染色体的相对长度。绘染色体时，长臂在下，短臂在上。 　　２．４核型公式及分类 　　根据上述核型分析，可得出攀援天门冬核型公式为２ｎ＝２０＝２Ｍ＋１４ｍ＋４ｓｍ，染色体相对长度组成＝４Ｌ＋４Ｍ２