实验室大型仪器介绍课件.ppt

* | Wireless Vision | Feb. 2010 RD配套Luminex试剂盒 human IFN- g human IL-2 human IL-4 human IL-5 human IL-6 human IL-10 human IL-17 human TNF-a human TNF-? Human CCL系列 Human VEGF mouse GM-CSF mouse CCL2 mouse IFN-g mouse IL-1 ? mouse IL-2 mouse IL-4 mouse IL-5 mouse IL-6 mouse IL-10 mouse TNF-a mouse VEGF * | Wireless Vision | Feb. 2010 Biosource配套试剂盒 Human/Mouse Th1/Th2 Cytokines Human/Mouse Chemokines Human/Mouse Inflammatory Cytokines Human/Mouse Growth Factor * | Wireless Vision | Feb. 2010 Linco配套试剂盒 人/小鼠/大鼠 Cytokine/Chemokine 疾病相关研究试剂盒： 内分泌（糖尿病、肥胖病、垂体激素等） 脂肪组织分泌代谢 心血管疾病 皮肤疾病 细胞代谢 骨代谢等 * | Wireless Vision | Feb. 2010 Upstate配套试剂盒 各种总/磷酸化的信号转导蛋白 Human/Mouse/Rat Cytokines Human/Mouse Chemokines Human Growth factor * | Wireless Vision | Feb. 2010 ELISPOT * | Wireless Vision | Feb. 2010 ELISPOT检测方法特点 通过两种高亲和力的特异性抗细胞因子抗体来检测淋巴细胞分泌细胞因子情况 在分泌细胞原处捕获该细胞分泌的细胞因子 斑点的生成属于一种显色反应：SPOT=细胞印迹 斑点可持久保存并进行计数分析 * | Wireless Vision | Feb. 2010 可在单细胞水平检测淋巴细胞对特异性抗原的反应能力 计数特异性抗原刺激下分泌性淋巴细胞产生的比例 有效、快速、灵敏度高 使用高吸附性的专用ELISPOT培养板 细胞因子的检测不易受非分泌细胞的干扰 比传统的ELISA和细胞内细胞因子染色法敏感20-200倍 易操作 样本量大的情况下实验结果可用计算机图象分析系统进行快速、客观的分析 优势 * | Wireless Vision | Feb. 2010 ELISPOT/FACS/ELISA 检测精确度比较 106抗原呈递细胞（APC）中混入特定数量的IFN-γ+的T淋巴细胞 ，经下列方法检测： ELISPOT 细胞内细胞因子染色（FACS） ELISA X坐标：106 APC中实际IFN-γ+T细胞数量 Y坐标： 各检测方法的检测结果 * | Wireless Vision | Feb. 2010 基 本 原 理 Coating Ab 包被培养孔并经BSA阻断 根据实验设计加入淋巴细胞及含或不含刺激因子的培养液孵育 * | Wireless Vision | Feb. 2010 活化的淋巴细胞可分泌细胞因子与Coating Ab结合 洗除细胞，依次加入生物素标记的抗细胞因子抗体及酶标抗生物素抗体进行反应 加入酶底物显色形成斑点（SPOT） * | Wireless Vision | Feb. 2010 主要用途 B细胞杂交瘤的筛选 化合物和药物免疫学反应的检测 优化树突细胞和T细胞的抗肿瘤活性 靶向疫苗的质控 自身免疫疾病的诊断和预后分析 自身免疫疾病免疫治疗的监控 过敏性疾病的脱敏治疗的监测 器官移植中排斥反应的预测 微量组织、肿瘤和免疫细胞分泌谱的分析 结核病的诊断 CTL酶联斑点自动图象分析仪 适用于分析： 酶联斑点(Elispot) 克隆形成（CFU） 病毒斑（Viral Plaque） * | Wireless Vision | Feb. 2010 PubMed搜索关键词immunospot或ELISPOT或ELISA-Spot所得历年文献数目 Coating Ab 包被培养板 0.05%PBS-Tween20(PBST) 洗板5次 每孔加入1%BSA阻断 按实验设计 加入含或不含刺激剂的培养液 及一定数目细胞孵育5-24小时 40C过夜 370C孵育1小时 取外周血单核细胞 或脾淋巴细胞 根据实验要求， 培养