[高二理化生]12DNA重组技术的基本工具.ppt

基因工程;基因工程的产物;烟草;;二、DNA重组技术的基本工具; (1)来源；主要来自原核生物 (2)作用： 1、识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列, 2、切割特定核苷酸序列中的特定位点 作用实质 使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（切割DNA分子） ; T;;;　;　;Sma Ⅰ;实例 1：;;要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？;二、“分子缝合针” —— DNA连接酶;2、来源；类型：; 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，;　;;1、来源;运载体：常用质粒 质粒特点：;(三)“分子运输车” ——基因进入受体细胞的载体;P6旁栏思考题：想一想，具备什么条件才能充当“分子运输车”？;小结;1、质粒是基因工程最常见的载体，它的主要特点是( ) ①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④是蛋白质 ⑤是环状RNA ⑥是环状DNA ⑦能“友好”地“借居” A、①③⑤⑦ B、②④⑥ C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦;2、在受体细胞中能检测出目的基因是因为( ) A、目的基因上有标记 B、质粒具有某些标记基因 C、重组质粒能够复制 D．以上都不正确; 已知标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素的基因，现探讨某细菌的质粒中有无标记基因或标记基因是什么？请设计实验、预期实验结果，并得出相应的实验结论。;;3、现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpn1单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是( );4、限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI、EcoRI、HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？ A. BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT— B. BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC— C. EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT— D. BamHI和BglII；末端互补序列—GATC—; (2010年北京海淀区???查)下图是含某目的基因的DNA片段，据图回答下列问题。 ;(3)如果要将用EcoRⅠ限制酶切割形成的目的基因片段导入受体细胞，一般需要_____作载体。其应具备的特点有：_____、___、___。 (4)E·coli DNA连接酶连接目的基因和载体时连接的是图中____(填字母)部位的化学键。 ;2、为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA？