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雄性不育大白菜小孢子败育与花蕾长度的关系 　　摘要：以复等位基因遗传的大白菜雄性不育两用系ＡＢ０１为材料，对蕾长与小孢子发育动态关系进行研究。形态调查结果发现，花蕾发育到１．７５ ｍｍ以后时，不育株雄蕊逐渐退化，花药逐渐变黄、干瘪；花蕾长度在１．５0～３．０0 ｍｍ时，不育花药的生长速度极为缓慢，该时期是花粉败育的关键时期；徒手压片结果显示，长度为１．５0 ｍｍ的不育花蕾中出现了四分体小孢子解体现象。在进行核不育基因表达分析研究时，花蕾样品分级标准应为蕾长＜１．５0 ｍｍ、１．５0～３．０0 ｍｍ和＞３．０0 ｍｍ ３个等级或者更加细化。 　　关键词：大白菜；雄性不育；蕾长；小孢子发育 　　中图分类号：Ｓ６３４．１文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11417－3552-04 　　 　　The Relationship between Bud Length and Microspore Abortion in Male-sterility 　　Brassica campestris L. ssp. pekinensis 　　 　　ＪＩ Ｒｕｉ－Ｑｉｎ，ＺＨＯＵ Ｘｕｅ，ＳＯＮＧ Ｑｉａｎ，ＸＩＮ Ｘｉ－ｆｅｎｇ，ＦＥＮＧ Ｈｕｉ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｕｓｉｎｇ ｇｅｎｉｃ ｍｕｌｔｉｐｌｅ－ａｌｌｅｌｅ ｉｎｈｅｒｉｔｅｄ ｍａｌｅ－ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ ｉｎ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ Ｌ． ｓｓｐ． pｅｋｉｎｅｎｓｉｓ， ｔｈｅ ｔｗｏ－ｔｙｐｅ ｌｉｎｅ “ＡＢ０１” ａｓ ｍａｔｅｒｉａｌ， ｔｈｅ ｄｙｎａｍｉｃ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｂｕｄ ｌｅｎｇｔｈ ａｎｄ ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｓｔａｍｅｎ ｏｆ ｓｔｅｒｉｌｅ ｐｌａｎｔ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｇｒａｄｕａｌｌｙ，ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｔｈｅ ａｎｔｈｅｒ ｂｅｃａｍｅ ｙｅｌｌｏｗ ａｎｄ ｓｈｒｉｖｅｌｅｄ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｂｕｄｓ ｌｅｎｇｔｈ ｒｅａｃｈｅｓ １．７５ ｍｍ. Ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ｏｆ ｓｔｅｒｉｌｅ ａｎｔｈｅｒ waｓ ｖｅｒｙ ｓｌｏｗ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔａｇｅ ｏｆ １．５－３．０ ｍｍ ｂｕｄｓ， ｗｈｉｃｈ waｓ ｔｈｅ ｋｅｙ ｐｅｒｉｏｄ ｏｆ ｐｏｌｌｅｎ ａｂｏｒｔｉｏｎ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｆｒｅｅ－ｈａｎｄ ｓｅｃｔｉｏｎｉｎｇ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｔｅｔｒａｄ ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｅ ｗａｓ ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ｉｎ １．５ ｍｍ ｓｔｅｒｉｌｅ ｂｕｄｓ． Ｓｏ ｂｕｄｓ were devided ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｔａｇｅｓ， ｓｔａｇｅ Ｉ； ｓｔａｇｅ ＩＩ ａｎｄ ｓｔａｇｅ ＩＩＩ ｏｒ ｏｔｈｅｒ ｍｏｒｅ ｓｔａｇｅｓ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｇｅｎｉｃ ｍｕｌｔｉｐｌｅ－ａｌｌｅｌｅ ｉｎｈｅｒｉｔｅｄ ｍａｌｅ ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ ｉｎ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ Ｌ． ｓｓｐ． pｅｋｉｎｅｎｓｉｓ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ Ｌ． ｓｓｐ． pｅｋｉｎｅｎｓｉｓ； ｍａｌｅ－ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ； ｂｕｄ ｌｅｎｇｔｈ； ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｅｓ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ． 　　 　　大白菜为两性花异花传粉蔬菜作物，杂种优势十分显著。由于其花器官小，单花结子少，而单位面积的播种量又较大，雄性不育系的利用是配制大白菜杂交种经济、可靠的制种手段。ＡＢ０１是沈阳农业大学蔬菜遗传育种课题组培育的大白菜核基因雄性不育两用系，已用其配制出４个稳定遗传的雄性不育株系［１］， 并提出了“大白菜核基因雄性不育复等位基因遗传假说”［２］。目前沈阳农业大学蔬菜遗传育种课题组已建立了一套该材料的应用技术体系，并实现了品种间和亚种间不育基因的交流，育成了多个新的具有１００％不育株率的雄性不育系［３，４］，并获得了不育基因Ｍｓ的一些分子标记［５，６］。但是该材料不育的分子机制尚不清楚。 　　在不育基因时序表达分析研究中，需根据小孢子发育状况把花蕾分成若干等级。孙日飞等［７］的研究认为大白菜核雄性不育系小孢子败育时期是四分体时期，但实际上小孢子的败育在此之前就已经开始。植物的雄性不育特性会使雄性不育植株形态发生变化，特别是与生殖有关的花蕾、花瓣、雄蕊、雌蕊等变化较大，许多研究发现，小孢子的发育时期与花蕾形态指