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- 2018-02-13 发布于江西
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几种常用的电泳
蛋白质的纯化方法 在外加电场作用下,带电的蛋白质颗粒在电场中移动的速度(v)取决于电场强度(E),所带的净电荷(q),蛋白质的分子量、分子形状以及与介质的摩擦系数(f)。 几种常用的电泳 纸电泳 醋酸纤维薄膜电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) (可分为圆盘电泳和垂直平板电泳) 琼脂糖凝胶电泳 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 等电聚焦(IEF) 双向电泳 蛋白质的纯化方法 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是利用聚丙烯酰胺凝胶作为支持物的电泳法,聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙稀酰胺和交联剂甲叉双丙稀酰胺交联而成的多孔网状凝胶。 不连续PAGE有分离胶、浓缩胶和样品胶。 PAGE分辨率很高。 电泳过程 蛋白质的纯化方法 SDS(十二烷基磺酸钠)是一种阴离子型表面活性剂,它能够与蛋白质多肽链中的氨基酸残基按大约1 ? 1.4比例结合。 每一个蛋白质分子都因为结合了许多的SDS而带有大量的负电荷,而蛋白质分子原有的电荷则可以忽略。该法主要利用了蛋白质分子量大小不同而分离蛋白质。 用已知分子量的蛋白质作为标准,则可以估算出不同蛋白质的分子量。 蛋白质的纯化方法 将两性电解质(eg:pH3-9,pH5-7)同蛋白质样品一起加入到已经灌好的凝胶中,在电场下,两性电解质首先达到它的等电点而平衡,蛋白质样品根据它自身的等电点分别向两极移动,最后也达到平衡。 等电聚焦:这种按等电点的大小,生物分子在p
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