黄顶菊叶片抑菌作用初步研究.docVIP

黄顶菊叶片抑菌作用初步研究 　　摘要：用水、５０％乙醇、８０％乙醇和９５％乙醇从黄顶菊叶片中提取活性成分，初步探讨了其抑菌作用，结果表明，黄顶菊提取物对大肠杆菌、产气杆菌和枯草芽孢杆菌均有不同程度的抑菌作用，其中乙醇提取液抑菌效果强于水提取液，且８０％乙醇提取物抑菌作用最强；４种溶剂提取物对大肠杆菌的抑制效果最强。 　　关键词：黄顶菊；提取物；细菌；抑菌活性 　　中图分类号：Ｓ４８２．２＋９２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11407－1386-02 　　 　　Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Bacteriostasis ｏｆ Ｆｌａｖｅｒｉａ ｂｉｄｅｎｔｉｓ Ｌｅａｖｅｓ 　　 　　ＬＵ Ｚｈａｎ－ｇｅｎ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｌｅａｖｅｓ of Ｆｌａｖｅｒｉａ ｂｉｄｅｎｔｉｓ ｗｉｔｈ ｗａｔｅｒ ａｎｄ ａｌｃｏｈｏｌｉｎ Ｈｅｎｇｓｈｕｉ Ｌａｋｅ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｉｔｉｇａｔｅｄ ｆｏｒ the ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍ Ｆｌａｖｅｒｉａ ｂｉｄｅｎｔｉｓ ｈａｄ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ， Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ａｎｄ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ． Ｔｈｅ ８０％ ａｌｃｏｈｏｌ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｈａｄ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｐｒｏｍｉｎｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ the ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａ． Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ ｏｆ ＰＷＥ ａｎｄ ＰＡＥ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ was ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒｓ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｆｌａｖｅｒｉａ ｂｉｄｅｎｔｉｓ； ｅｘｔｒａｃｔ； ｂａｃｔｅｒｉａ； ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ 　　 　　黄顶菊是菊科黄菊属［１］一年生外来入侵植物。目前对其研究主要集中在如何防除上，但黄顶菊具有很好的抗虫、抗菌活性［２］。黄菊属的近缘属植物万寿菊已被列入杀虫性植物，其主要杀虫成分α－三连噻吩是一种典型的光活化毒素，且杀虫活性和α－三连噻吩的含量成正相关［３］，对植物病原菌具有光活化毒杀增效作用。而α－三连噻吩在黄顶菊中分布广泛，含量很高［４］，黄菊属植物还能合成酚类化合物中的硫酸盐类黄酮物质，也具有强的抑菌效果［５］。因此，黄顶菊有望成为一种新的天然农药提取植物。 　　笔者研究了黄顶菊叶片提取物对３种细菌的抑制作用，以期为植物源抑菌剂开发提供理论基础。 　　１材料和方法 　　１．１材料与设备 　　１．１．１实验材料黄顶菊叶片，２００８年１０月采于衡水湖边。 　　１．１．２实验菌种大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、产气杆菌菌种由衡水学院生命科学系微生物实验室提供。 　　１．１．３培养基牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏５．０ ｇ、蛋白胨１０．０ ｇ、琼脂２０．０ ｇ、ＮａＣｌ ５．０ ｇ、水１ ０００ ｍＬ，ｐＨ值 ７．０。 　　１．１．４主要仪器设备及试剂ＳＢ－ＪＳ－１超净工作台、ＣＸ－２５０超声波清洗仪、ＺＤ－８５气浴恒温振荡器、ＹＸＱ－ＬＳ－ＳＨ全自动立式电热压力蒸汽灭菌锅、ＦＡ１００４Ｎ电子天平、微调移液器，ＨＨ－６数显水浴锅、烘干箱、５００ ｍＬ蒸馏瓶、研钵；蒸馏水、５０％乙醇、８０％乙醇、９５％乙醇、６ ｍｍ滤纸片等。 　　１．２实验方法 　　１．２．１黄顶菊叶片浸提液制备将黄顶菊叶片洗净、６０烘箱烘干，将叶片称取６份，每份１０ ｇ，在干净的研钵内研碎，分别于蒸馏水、５０％乙醇、８０％乙醇、９５％乙醇各１６０ ｍＬ中浸泡，并置于超声波破碎仪中振荡２０ ｍｉｎ后移至气浴恒温振荡器２８振荡２ ｄ，残渣继续用以上４种不同浸提液５０ ｍＬ浸泡，于振荡器中振荡过夜， 次日将第一次与第二次的提取液混和，水浴锅蒸馏，提取溶剂约有２５ ｍＬ时取出，２５ ｍＬ容量瓶定容，置于 ４冰箱冷藏待用。 　　１．２．２培养基的制备培养基分装到三角瓶，１２１高压灭菌２０ ｍｉｎ待用。 　　１．２．３菌悬液的制备把供试的各种菌种进行斜面活化，然后用１０ ｍＬ无菌生理盐水把已活化的供试菌从试管中混匀，制成菌悬液，再用无菌吸管取 １ ｍＬ充分混合的菌悬液于试管中，加入９ ｍＬ无菌生理盐水，调制浓度为含菌体为１０６～１０７个／ｍＬ的菌悬液备用。 　　１．２．４含菌平板的制备将无菌培养基趁热倒于平皿中，凝固后，将上述各菌悬液用移液枪取１００ μＬ滴到平皿，再