实验33培养基配制，消毒灭菌.ppt

实验33 培养基的制备及消毒与灭菌 基础生物学实验（三） 培养基配制实验原理 培养基是按照微生物生长发育的需要，用不同组分的营养物质调制而成的营养基质。 人工制备培养基的目的，在于给微生物创造一个良好的营养条件。 培养基配制要素 营养：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐； 适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力； 一定的氧化还原电位； 合适的渗透压。 营养六要素 碳源：提供微生物繁殖所需碳元素的营养物质。用途：糖、蛋白质、核酸合成。 氮源：提供微生物繁殖所需氮元素的营养物质。用途：蛋白质、核酸合成。 能源：提供微生物生命活动最初能量来源的营养物或辐射能。 生长素：微生物生长必需，但又不能自行合成的有机物。 无机盐：提供微生物繁殖所需各种重要元素。 水分：水是保证生命活动重要的介质。 培养基灭菌 配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物 微生物生长繁殖： 消耗养分 改变培养的酸碱度 产生毒素或者抑制物 培养基的分类 根据微生物的种类和实验目的的不同，培养基分类可以按以下方式： 按成分的不同分 按培养基的物理状态分 按培养基的用途分 牛肉膏蛋白胨培养基的制备 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基； 牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素； 蛋白胨主要提供氮源和维生素； NaCl提供无机盐； 在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂； 用稀酸稀碱将其pH调至中性或微碱性。 牛肉膏蛋白胨培养基配方 牛肉膏： 3.0g 蛋白胨： 10.0g NaCl ： 5.0g 水 ： 1000mL pH ： 7.4~7.6 琼脂 ： 15~20g 操作步骤 称量 溶化 调pH 过滤 分装 6. 加塞 7. 包扎 8. 灭菌 9. 搁置斜面 10. 无菌检查 高氏Ⅰ号培养基的制备 高氏Ⅰ号是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。 如果加入适量的抗菌药物，则可用来分离各种放线菌。 此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。因此，在混合培养基成分时，一般是按配方的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将二种或多种成分分别灭菌，使用时再按比例混合。 高氏Ⅰ号培养基配方 可溶性淀粉： 10 g NaCl： 0.25 g KNO3： 0.5 g K2HPO4·3H2O： 0.25 g MgSO4·7H2O： 0.25 g FeSO4·7H2O： 0.005 g 琼脂： 10 g 水： 500 mL pH： 7.2~7.4 马丁氏培养基的配制 马丁氏培养基是一种用来分离真菌的选择性培养基。 这种培养基的特点是培养基中加入了孟加拉红和链霉素，能有效抑制细菌和放线菌的生长，而对真菌无抑制作用，因而真菌在这种培养基上可以得到优势生长，从而达到分离真菌的目的。 马丁氏培养基配方 K2HPO4 ： 1 g MgSO4·7H2O： 5 g 蛋白胨： 5 g 葡萄糖：