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实验五 限制性内切酶的酶切反应
实验五 限制性内切酶的酶切反应;概 述;5、活性单位
一般20μl反应液中，37℃条件下，反应1小时，将1μg的DNA完全分解所需的酶量
注意：最适反应温度不同，BamHⅠ（30 ℃）
6、双酶切（Double digestion）
a.使用通用缓冲液
b.在较低的盐浓度下进行一个酶切反应，补加盐后再进行另一个酶切反应
c.完成一个酶切反应后，进行氯仿抽提和乙醇沉淀，DNA沉淀溶解后再进行第二次酶切反应
;技术要点及注意事项;pUC118-GUS图谱;单酶切检测pAct1IsGFP-1的电泳图
M1：λHindⅢ；1：AccⅠ酶切pAct1IsGFP-1；
2：BamHⅠ酶切pAct1IsGFP-1；M2：DL2000;思 考 题;再 见 ！
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