第十六章--色谱法分离原理精选.ppt

* LC板高极小值比GC的极小值小一个数量级以上，说明液相色谱的柱效比气相色谱高得多；LC的板高最低点相应流速比起GC的流速亦小一个数量级，说明对于LC，为了取得良好的柱效，流速不一定要很高。 * (2) 分子扩散项和传质阻力项对板高的贡献 较低线速时，分子扩散项起主要作用；较高线速时，传质阻力项起主要作用；其中流动相传质阻力项对板高的贡献几乎是一个定值。 在高线速度时，固定相传质阻力项成为影响板高的主要因素，随着速度增高，板高值越来越大，柱效急剧下降。 * 分子扩散项和传质阻力项对板高的贡献 * 5. 固定相粒度大小对板高的影响 粒度越细，板高越小，并且受线速度影响亦小。 这就是为什么在HPLC中采用细颗粒作固定相的根据。当然，固定相颗粒愈细，柱流速愈慢。只有采取高压技术，流动相流速才能符合实验要求。 * 固定相粒度大小对板高的影响 * 第四节 分离度 分离度R是一个综合性指标。 分离度是既能反映柱效率又能反映选择性的指标，称总分离效能指标。分离度又叫分辨率，它定义为相邻两组分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽总和之半的比值，即 R = 2 (tR2 - tR1) / (W1 +W2 ) * R值越大，表明相邻两组分分离越好。一般说，当R1时，两峰有部分重叠；当R=1时，分离程度可达98%；当R=1.5时，分离程度可达99.7%。 通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志。 * 图1表示不同分离度时色谱峰分离的程度 * 基本的色谱方程的表达式(P372) * 1.分离度与柱效的关系 由分离方程式看出，具有一定相对保留值α的物质对，分离度直接和有效塔板数有关，说明有效塔板数能正确地代表柱效能。而分离方程式表明分离度与理论塔板数的关系还受热力学性质的影响。当固定相确定，被分离物质对的α确定后，分离度将取决于n。这时，对于一定理论板高的柱子，分离度的平方与柱长成正比，即 * 说明用柱长的色谱柱可以提高分离度，但延长了分析时间。因此，提高分离度的好方法是制备出一根性能优良的柱子，通过降低板高，以提高分离度。 * 2. 分离度与选择因子的关系 由基本色谱方程式判断，当 α= 1时，R = 0。这时，无论怎样提高柱效也无法使两组分分离。显然，α大，选择性好。研究证明α的微小变化，就能引起分离度的显著变化。一般通过改变固定相和流动相的性质和组成，可有效增大α值。 * 5．基本色谱分离方程式的应用 ? 在实际中，基本色谱分离方程式是很有用的公式，它将柱效、选择因子、分离度三者的关系联系起来了，知道其中两个指标，就可计算出第三个指标。 * ［例18-1］有一根 lm长的柱子，分离组分1和2得到如图18d5的色谱图。图中横坐标l为记录笔走纸距离。若欲得到 R=1.2的分离度，有效塔板数应为多少？色谱往要加到多长？ * 解：先求出组分2对组分1的相对保留值r2，1（即α值） * 求有效塔板数neff neff＝16×（0.8）2[1.1/(1.1-1)]2＝1239 若使R=1.2,所需塔板数可计算,即 * 因此,欲使分离度达到1.2,需有效塔板数为2788块,则所需柱长为 L=2788/1329×1m=2.25m * [例18-2] 已知某色谱柱的理论塔板数为3600,组分A和B在该柱上的保留时间为27mm和30mm,求两峰的峰半宽和分离度. 解: ∵ Y1/2=Y/1.7 w1=27/(3600/16)1/2=1.8 mm (w1)1/2＝1.8/1.7＝1.06 mm w2=30/(3600/16)1/2=2.0 mm (w2)1/2＝2.0/1.7＝1.18 mm R＝2(30-27)/(1.8+2)＝6/3.8＝1.6 * [例18-3] 已知一色谱柱在某温度下的速率方程的A=0.08cm; B=0.65cm2/s; C=0.003s, 求最佳线速度u和最小塔板高H. 解: 欲求 u最佳和H最小,要对速率方程微分,即 dH/du＝d(A+B/u+Cu)/du ＝-B/u2+C＝0 而,最佳线速: u最佳＝(B/C)1/2 最小板高: H最小＝A+2(BC)1/2 可得 u最佳＝(0.65/0.003)1/2＝14.7cm/s H最小＝0.08+2(