[理学]果蝇遗传学实验_2010.pptVIP

遗传学实验 主要内容及安排（I) 1. 果蝇的饲养及性状观察 (教材P63.)（第9周） 2. 果蝇唾腺染色体标本的制备与观察(教材P9.及补充材料）（第9周） 3. 果蝇的遗传分析（单因子、双因子、伴性遗传、三点试验） (教材P14.P25.P19.P35.)（第9-14周） 4. 细胞有丝分裂标本的制备与观察(教材P208.）（第10周） 5. 减数分裂标本的制备与观察(教材P1.及补充材料）（第10周） 6. 染色体组型分析(教材P213.及补充材料）（第10周） 7. 数量性状遗传分析：人类指纹的分析(补充材料）（第11周） 主要内容及安排（II) 8. 大肠杆菌转化实验(教材P136.及补充材料）（第11周） 9. 未知质粒限制性作图(补充材料）（第12周） 10.果蝇的诱变实验/诱变物质的微核测试(教材P261.等） 实验设计（实验方案的报告及讨论，每组预备3-5min PPT）（第12周） 主要内容及安排（III) 果蝇遗传学分析实验进展、总结报告（每组预备3-5min PPT）（第13-14周） 探究性实验实施、总结报告（每组预备3-5min PPT） （第13-14周） 一、果蝇遗传学实验 1、果蝇的饲养和性状观察 2、果蝇唾腺染色体标本的制备与观察 3、果蝇的遗传分析（单因子、双因子、伴性遗传、三点试验） 1、果蝇的饲养和性状观察 1.了解果蝇用于遗传学研究的一些背景知识 2.学会果蝇的饲养和麻醉等操作 3.观察果蝇的基本性状 果蝇：遗传学研究的好材料 Drosophila melanogaster (fruit fly, 黑腹果蝇) 个体小、易于操作 生活周期短 后代多 突变体多 4对染色体 果蝇的饲养及操作 培养基：玉米粉；香蕉；米粉 20-25 ℃ 麻醉、操作：乙醚、CO2；麻醉器、毛笔、白纸/白瓷板 等 4 stages: - egg （卵） - larva（幼虫） - pupa （蛹） - adult （成虫） 突变体/Mutants (I) 果蝇常见的突变性状 其它突变体示意图 性别差异/sex difference Genome/基因组 2＃： Vestigial/残翅 6＃： 三隐性 18＃： Wild type/野生型 22＃： White eye/白眼 e： Ebony/黑檀体 果蝇的性状观察 果蝇的麻醉操作要点 - 往“麻醉器”中滴加2-3滴乙醚； - 轻拍饲养瓶，将果蝇赶离瓶口； - 将“麻醉器”口套在饲养瓶口，倒转； - 轻拍饲养瓶，使果蝇麻醉并掉落“麻醉器”收集盖； - 打开收集盖，将麻醉的果蝇倒在白纸上； - 观察果蝇的麻醉程度：麻醉过度致死的果蝇其翅膀与身体呈45度角； - 用放大镜、或在解剖镜、低倍镜下观察果蝇的形态、性状； - 如有必要，可滴加少量乙醚于白纸，用平皿盖住苏醒的果蝇，使其再麻醉； - 用毛笔将果蝇移入饲养瓶，平放直到果蝇苏醒。 作业与思考 2. 果蝇唾腺染色体的制备与观察 练习取出果蝇唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的方法。 观察唾腺染色体的特征：巨大、多线、体细胞联会、横纹、疏松区 等。 绘多线染色体图。 实验材料与步骤 剖取唾腺： 解离： 染色： 压片： 观察： 果蝇的唾腺 唾腺与肠道的区别 唾腺染色体 （例） 作业与思考 3.1，Monohybrid cross expt.单因子实验 3.2，Independent assortment of dihybrid cross expt./双因子实验 3.3，Sex-linked inheritance伴性遗传 3.4，Three-point testcross  三点试验 Procedure of Cross expt.杂交实验步骤 1st week, collect virgin female 收集处女蝇 2nd week, cross parents 父母本交配（5-6对） 3rd week, remove all parents 去除父母本 4th week, Record F1 data do F1×F1 记录F1数据，F1自交（5-6对） 6th week, Record F2 data Chi-square test 记录F2数据（统计一周）， χ2 检验; 或F2（雌） 与三隐形（雄）测交，一周后统计后表型，计算基因相对距离和顺序。 Data table / 数据表 （举例） Chi-square test /χ2 检验 Hypothesis： 假设 Degree of freedom=n-1=