微生物快速检测技术与原理PPT.ppt

华粤企业集团有限公司 ;*;*;*;*;常规微生物项目：细菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、酵母总数、霉菌总数 致病微生物项目：沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157：H7、弯曲杆菌、致病弧菌、副溶血弧菌、志贺氏菌、假单胞菌等 ;市场销售环节要求快速出货，尤其是一些保质期较短的产品。 减少物流的压力，尽可能减少库存，加快资金周转。 节约人力资源成本 对于运行HACCP质量保证体系的企业来说，快速检测方法非常重要。可以快速检测原料及半成品的微生物状况，以采取相应的措施控制最终产品的微生物情况。;快速检测产品不少，但真正使用的企业不多。 原因一：成本的原因。绝大多数快速检测产品来自国外，成本相对偏高，而中国的人力成本相对便宜，对于检测量小的企业，不会考虑快速检测；而对于每天检测量大的企业又担心成本问题。 原因二：技术的原因。虽然市面上有不少微生物快速检测产品，但或多或少都有一定的技术局限性。一方面与样品的加工工艺有关（譬如添加防腐剂等），另外一方面与检测产品的技术原理等有关。;美国EPIC、Celsis、Millipore、PALL 英国DWS Rabit 奥地利Sylab Bactrac 法国 Bact/Alert 3D、Tempo 美国Soleris， Biolumix 法国AES Chemunex Bactiflow、D-count、RDI 日本Dox;ATP法：EPIC、Celsis MPN法：Tempo 膜过滤染色法： Millipore、PALL 电化学法：DWS Rabit 、SyLab Bactrac 4300、 Dox 颜色变化：Soleris、Biolumix、Bact/Alert 3D 流式细胞技术： AES Chemunex Bactiflow、D-count 激光扫描技术： AES Chemunex RDI;ATP （三磷酸腺苷）来源于;EPIC;优点：通常用于进行商业无菌检测。可大大缩短库存时间，减少物流压力和成本。 缺点：ATP方法需要消耗大量的较昂贵的试剂，对仪器的清洗保养要求特别高。另外，客户通常怀疑假阴性和假阳性的可能，特别是用ATP单个检测代替常规微生物和致病微生物检测，其风险是一定存在的。(如保温增菌时间不够，菌数未达到一定数量，取样量太小，由于培养基原因，目标菌未大量增菌等原因);美国默克Millipore Milliflex? Quantum 美国Pall公司的Pallchek ;;可过滤样品经膜过滤后，将菌截留在特殊的滤膜上，滤膜放置在培养基表面增菌后取出，加入荧光试剂，荧光染料在微生物体内分解后积累，通过检测荧光信号来到达计数的功能;优点：缩短培养时间，提高灵敏度，适合于菌数较低的可过滤产品使用。 缺点：仪器较昂贵，运行成本比较贵。;基于MPN(最大近似值)原理，实现自动计数 ; 将一定浓度的样品稀释液加入定量的专用培养基后，通过充填方式将样品液充填至48孔测试卡后，经适当的培养（细菌总数测定要求37℃培养40h），根据各孔道内细菌的生长状况，由读卡站进行荧光检测，自动读取结果并换算出样品中的目标菌数值。; 优点： 自动动化程度高一些。 缺点：主要用于检测菌落总数 耗材成本昂贵;英国DWS公司的Rabit 奥地利Sylab公司的Bactrac4300 日本的DOX;Bactrac4300;;IDT与样品中的菌数的对数呈线性关系 校准曲线表示菌数对数与IDT的关系 校准时，同时做电化学法和标准方法，将菌数与IDT填入表格中，自动生成标准曲线，并自动计算相关系数及离散度。;优点：检测成本低，检测时间明显缩短。 可用于微生物生长曲线测定，微生物抑菌研究，防腐剂和消毒剂研究等领域。 缺点：仪器较昂贵，定量检测时需要校正曲线。;;目前只能检测细菌总数、大肠菌群和大肠杆菌 方法的准确性和检测精度值得考虑 需要专用的电极盒，试剂相对也比较贵;美国的Soleris、Biolumix 法国的BacT/Alert 3D;Biolumix;微生物生长导致培养基 pH值发生变化，由光学 检测器检测底部琼脂层 的颜色变化，记录达到 突变点的时间。;与阻抗法类似，可以实现快速检测。 缺点：需要购买原厂的预装培养基，应用范围受限制，成本高昂。;与阻抗法类似，可以实现快速检测。 缺点：需要购买原厂的预装培养基，应用范围受限制，成本高昂。;BacT/Alert 3D ;基于微生物生成产生CO2的原理。CO2积累越多，底部的CO2传感器颜色由蓝绿色变浅，由LED发射一束光至底部，探头检测反射光的强度。光强度与微生物数量有一定关系。;优点：用于临床血培养 缺点：耗材太贵，而且含有对环境有害AsCO2;丹麦Foss Bacto