植物胚胎培养课件.ppt

什么叫胚胎？ 植物在受精后，受精卵形成合子，随即进行第一次分裂，进而形成分生组织和幼胚，再发育成成熟胚 那什么是胚胎培养？ 是指对植物的胚、子房、胚珠、胚乳进行离体培养，使其发育成完整植株的技术 植物胚胎培养 胚胎培养的类型 第一节、植物胚培养 本节内容提要 一、胚培养的类型 二、胚培养的应用 三、幼胚培养方法 四、影响胚培养的因素 一、胚培养 依据所剥离胚的发育时期不同： 成熟胚培养 成熟胚培养 不依赖胚乳的贮藏营养 只要提供合适的生长条件及打破休眠 在含有大量元素的无机盐和糖的培养基上萌发生长，形成幼苗 成熟胚培养一般较易获得成功 2、胚培养的应用 一、克服远缘杂交不亲和性 将早期幼胚进行离体培养，可克服受精障碍。 二、打破种子休眠，缩短育种周期 三、提高种子萌发率 针对一些长期营养繁殖的植物种子。 3、幼胚培养的方法 材料的选择 一般的实验、示范：选大粒种子 希望材料的胚发育时期具一致性：选开花和结实习性有规律性的植物 希望培养某一发育时期的胚：要确定授粉后天数与胚胎发育的相应关系 灭菌：取大田或温室里授粉受精后的植物子房→70%酒精消毒→0.1%氯化汞灭菌（10-30分）→无菌水冲洗（3、4次） 二、幼胚的分离与培养 分离：灭菌材料→切开子房壁→取出胚珠，剥离珠被→于培养基培养 培养：胚离体培养发育时期分为异养期和自养期。在心形期转入自养生长。对于难培养的幼胚，可利用胚乳看护培养。 培养 胚的发育对营养的要求有2个阶段，即： 异养期：这一时期的幼小胚完全依赖胚乳和周围的母体组织提供营养。 自养期：这一时期胚能吸收培养基中的无机盐和糖，经过自身的代谢作用合成其生长必需的物质，在营养上已可以完全独立。 4、影响胚培养的因素 一）培养基 1、无机盐： 成熟胚培养基相对简单，如White。幼胚培养有MS、B5等，可使K+、Ca2+水平稍高，NH4+的水平变低。 2、碳水化合物： 糖的作用： 调节渗透压；碳源；防止幼胚早萌。 渗透压的保持对于幼胚培养相当重要。最适蔗糖浓度随着胚的发育时期而降低。 胚发育早期要求较高的的渗透压，而随着胚的发育逐渐降低。 3.氨基酸和维生素 无论单一还是复合的氨基酸，都能促进胚生长 维生素对发育初期的幼胚培养是必需的，而对已成长的胚的形态发生有抑制作用 第二节、植物胚乳培养 胚乳培养（Endosperm culture）： 是指将胚乳组织从母体上分离出来，通过离体培养，使其发育成完整植株的技术。 三倍体后代特征 形态特征：由于被子植物的胚乳是三倍体，所以胚乳培养过后，得到的是三倍体植株，产生无子果实，或加倍产生六倍体植物。 优点：无子果实食用方便，多倍体植株更粗壮、叶片大而肥厚、叶色浓、花大、果实大。 影响胚乳培养的因素 （一）培养基与培养条件 常用培养基：White、LS、MS、MT 植物激素对愈伤组织的诱导和生长起重要作用 在没有任何外源激素的培养基中，不能或很少诱导成功 适宜温度：25℃左右 光照和ph: 因植物而异 （二）胚在胚乳培养中的作用 2种培养方式：带胚培养和不带胚培养 带胚培养比不带胚的要容易形成愈伤组织 胚对胚乳培养的影响与胚乳的生理状态或年龄有关 胚对胚乳有增值作用 （三）胚乳发生类型和发育程度 胚乳的发生方式：核型、细胞型、沼生目型。 胚乳的发育时期：早期、旺盛生长期、成熟期 越接近成熟和完全成熟的胚乳，愈伤组织的诱导率越低。 胚乳培养的应用： 获得三倍体幼苗和植株，用于育种利用。三倍体植株具有营养体大，无籽等特点。如无籽西瓜。 胚乳培养也会产生较多的混倍体，影响育种利用。但可用于染色体工程研究。 胚乳培养也为研究这些产物的生物合成和代谢提供了一个很好的实验系统。 胚乳再生植株的倍性： 胚乳愈伤组织及再生植株的染色体数常常发生变化。 同一植株往往为不同倍性细胞的嵌合体。 染色体倍性混乱。 影响胚乳细胞染色体稳定性的因素： 胚乳类型 胚乳愈伤组织发生部位 培养基中外源激素的种类和水平 外源激素的配比不仅决定胚乳细胞的增值和分化，还影响胚乳细胞染色体的倍性变化 * * 植物胚胎培养 培养类型 幼胚培养 (immature embryo) 成熟胚培养 (mature embryo) 子叶形成之前 子叶形成之后 成熟胚珠 合点 珠心 珠被 珠柄 珠孔 胚囊 成熟胚培养 、 幼胚培养：是指处于原胚期、球形期、心形期、鱼雷期的胚培养；幼胚完全是异养的，离体条件下培养要求培养基成分复杂，培养不易成功。 幼胚培养的基本程序 取子房 常规表面消毒 解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚。 固体培养 幼胚培养 三种生长方式： 胚性发育： 胚只是在体积上增大