[农学]hzau微生物遗传第六章质粒.pptVIP

* * 第六章 质 粒 质粒：是指存在于细菌、真菌等微生物细胞中、独立于染 色体外、能进行自我复制的遗传因子。 a、可以整合到染色体上，又可以游离于染色体外（附加体） b、质粒通常是共价、闭合、环状双链DNA(covalent closed circular DNA，简称cccDNA)， c、分子大小范围从l kb左右到1000 kb。 第一节 质粒的发现和命名 大肠杆菌的F因子是第一个被发现(1946年)的细菌质粒，它的发现对细菌遗传学的发展产生了深远的影响。 日本学者(1957年)报道了志贺菌(Shigella)中质粒介导抗生素抗性的转移现象。 在以后的20多年中，陆续发现各种细菌携带质粒，且它们的表型特征已远远超过了致育性和药物抗性的范围。 一、质粒的发现 二、质粒的命名原则 1976年Novick等提出一个可为质粒研究者普遍接受和遵循的命名原则： 质粒的名称一般由几个英文字母及编号组成，第一个字母一律用小写p表示，后两个字母应大写，可以采用发现者人名、实验室名称、表型性状或其他特征的英文缩写。 编号为阿拉伯数字，用于区分属于同一类型的不同质粒，如pUC18和pUC19, pBR322等。 第二节 质粒的遗传特征 一、 质粒的大小和拷贝数 质粒的大小：一般在1-200kb，最大的可达1400kb(如苜蓿根瘤菌质粒pRm141a)。 质粒拷贝数是确定某种质粒特性的一个重要参数，从中也可获得其复制本质的基本信息。一般而言，质粒的拷贝数与其分子质量成反比关系，分子质量大的拷贝数低，分子质量小的拷贝数高。 质粒可根据其拷贝数分为严谨型质粒（Stringent plasmid）和松弛型质粒（Relaxed plasmid）。 质粒在细胞内复制时受到控制而与染色体复制同步进行，被称为严紧型质粒。其拷贝数也低，通常只有1-3个拷贝。如F质粒。 另一类质粒的复制与染色体复制不同步，称为松驰型质粒。通常每个细胞含有10-100个拷贝，属于高拷贝质粒。如分子量小的CoLEl质粒。 大多数的质粒均控制着宿主细胞的一种或几种特殊性，即具有一定的表型，质粒可依其表型的不同主要划分为以下几种类型: 致育质粒 抗药性质粒 产生毒素的质粒 降解质粒 致病性质粒 共生固氮质粒 二、 质粒编码的遗传表型 这类质粒(R质粒)能使宿主微生物对抗生素、化学药物或重金属离子等杀菌剂表现出抗性。 R质粒 R100 降解质粒 乙醛 丙酮酸盐 水扬酸盐 萘 根癌农杆菌Ti质粒 Opines:冠樱碱 Octopine（章鱼碱） Nopaline（胭脂碱） 三、 质粒的复制 细菌染色体是一个复制子，每一个质粒也是一个复制子。 复制起点是复制于起始复制的部位，作为一个复制子，至少需要有一个复制起点，即ori位点。大肠杆菌染色体的复制起点称为oriC，质粒的复制起点叫做oriV。 质 粒 复 制 子 拷 贝 数 pBR322及其衍生质粒 pMB1 15-20 pUC系列质粒 pMB1 500-700 pACYC及其衍生质粒 p15A 10-12 pSC101及其衍生质粒 pSC101 ∽5 ColE1 ColE1 15-20 几种常见质粒载体所携带的复制子 质粒的复制主要是通过θ型复制和滚环复制两种方式之一进行的，其中以θ型复制为主。在θ型复制中，有单向复制和双向复制两种类型。 革兰氏阴性细菌中多数质粒是以θ型方式复制，R1、R100等是单向复制，F、R6k等是双向复制类型。 1. 质粒复制的方式 在革兰氏阳性细菌中大多数质粒是以滚环方式复制。 复制起点是一段特定的DNA序列，长约几百碱基对，在其相关的调控元件中含有由质粒或宿主染色体编码的、参与DNA合成起始调控因子的结合位点。 ori区域常决定了质粒的许多特性，如质粒的寄主范围和质粒的拷贝数。 2. 复制起点(ori)区的功能 四、不相容性和质粒的类群 质粒不相容性：是指亲缘关系相近的两种质粒，在非选择性条件下常不能稳定地存在于同一个细胞中，经过若干代的培养，只含有同一种质粒的细胞越来越多，而含有两种质粒的细胞相对减少。这种现象称为质粒的不相容性（incompatibility）。 一般来说，同一类型的质粒是不相容的，而不同类型的质粒则是相容性的。 细菌种类 质粒不相容群 代表性质粒 革兰氏阴性细菌 IncFⅠ F, R386, R455, ColV ? IncFⅡ R1, R100 ? Inc