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[高一理化生]22动物细胞工程 2
阅读教材p44-47第1段,思考下列问题: 1. 什么是动物细胞培养? (概念、原理) 2. 怎样进行动物细胞培养?(过程) 3.动物细胞培养需要什么条件?(条件) 4.动物细胞培养在哪些方面应用?(应用) 动物细胞生长特性: 原代培养 (primary culture) 定义:把把动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 传代培养 (subculture) 定义: 当原代培养的细胞生长停止,这时如果要使细胞继续生长,就要及时用胰蛋白酶等,使细胞从瓶壁上解离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养。 阅读教材p47-50页,思考下列问题: 1.动物细胞的克隆为什么要通过核移植技术来实现?(原因) 2.什么是动物细胞核移植? (概念、原理) 3.怎样进行动物细胞核移植?(过程) 4.动物细胞核移植在哪些方面应用?(应用) 5.动物细胞核移植技术存在一些什么问题? 1、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核? 3、你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么? 1、成功率比较低2、大多存在健康问题3、克隆动物食品安全问题 动物细胞融合 二、单克隆抗体 B淋巴细胞与抗体 单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体? 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 单克隆抗体制备过程 * 2.2 动物细胞工程 单克隆抗体等 动物细胞工程常用的技术 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 是其他动物细胞工程技术的基础。 自主学习 1.动物细胞培养 如何进行细胞培养?培养时又需要提供哪些必要条件呢? 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 1.1概念 1.2 动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬液 原代培养细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶 洗涤、稀释、分离 原代培养 用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 比老龄动物的组织细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,增殖能力越强,越容易培养。 动物细胞培养不能最终培养成生物体 细胞增殖缓慢,核型可能变化 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 贴壁生长 接触抑制 10代以内,保持正常二倍体核型 传代培养 10代细胞 细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。 要求: 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制: 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。 过程:从动物机体中取出组织 ? 剪碎 ? 加胰蛋白酶? 细胞游离 ? 加培养液 ? 将细胞接种到培养瓶内 ? 培养(1—2天换一次培养液)? 细胞贴壁生长 ? 长成单层细胞 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考以下问题: 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质? 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件? 讨 论 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子和 动物血清等。 适宜温度、PH和气体环境;无菌无毒环境 培养条件 1.无菌、无毒环境 2.全面的营养物质 3.适宜的温度和PH 4.气体环境 (抗生素;定期更换培养液) (合成培养基;血清) 36.5±0.5℃; 7.2----7.4 O2和CO2(95%空气和5% CO2 ) 动物细胞培养的应用 1.大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体) 2.为基因工程提供受体细胞 3.获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮 4.培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性 5 .为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据 获得细胞 细胞的全能性 细胞或细胞产品 新的个体或细胞产品 培养结果 或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清促生长因子 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原 理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 自主学习 2.动物细胞核移植技术和克隆动物 将动物的一个细胞核,移入
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