临床本科3-溶贫检测演示幻灯片.pptVIP

第四节 血型鉴定与交叉配血 血型定义： 红细胞系统血型： 一、ABO系统与临床意义 1、分型原则 根据红细胞膜上含有抗原和血浆中含有相应抗体分为A、B、AB、O四型 血型（表型）红细胞上抗原 血浆中抗体 基因型 A A 抗B AA、AO B B 抗A BB、BO O 无 抗A、 抗B、抗AB OO AB A、B 无 AB 第三节 溶血性贫血检测 溶血性贫血定义： 红细胞的生存时间缩短15～20天以下，破坏速度超过骨髓的代偿造血能力时，才出现贫血 发病机制分类： RBC内在因素（遗传性/先天性） RBC外在因素（获得性） free Hb (a2b2 tetramers) Hb dimers Haptoglobin（Hp） haptoglobin- hemoglobin complex kidneys liver metHb binds to hemopexin albumin ferriheme (Fe3+) globin 溶贫的临床表现 急性：发热、畏寒，可出现Hb尿，肾功能改变 慢性：贫血、黄疸、脾肿大、免疫指标异常，胆红素代谢异常 红细胞破坏增多的依据 RBC寿命15天 血片见RBC碎片 血浆游离Hb增高（血管内溶血） Hb尿检测（＋），酱油色 尿含铁血黄素试验（＋） 血清非结合胆红素增高 尿胆原增高 血清结合珠蛋白减低 血浆高铁血红素白蛋白检测 球形红细胞 破碎红细胞、盔形红细胞等 一、溶贫筛查试验 1、血浆游离Hb测定正常值：50mg/L 意义：血管内溶血的指征 2、血清结合珠蛋白测定 正常值：0.7~1.5g/L 各种溶血时结合珠蛋白均可减低，严重血管内溶血明显减低，甚至测不出（血浆游离血红蛋白超过1.3g /L时）。 巨幼细胞贫血、严重肝病、口服避孕药、先天性无结合珠蛋白血症等减低或消失。 增高见于炎症、感染、组织坏死、恶性肿瘤、风湿性疾病、口服避孕药、类固醇激素治疗。 3、血浆高铁血红素清蛋白检测 正常： 阴性 严重血管内溶血时呈阳性 4、RBC寿命测定（最佳） 正常值：25~32天 51Cr同位素标记，半衰期15天，说明有溶血存在。 5、尿含铁血黄素试验（Rous test) 正常值：阴性 溶贫中阳性只占10~20% 三、酶缺陷的检验 1、 高铁血红蛋白还原试验 G6PD 高铁血红蛋白还原酶 G6P NADP 还原型美兰 HbFe3+ 6PG NADPH 氧化型美兰 HbFe2+ NaNO2　 正常值：定性法（－） 半定量法 还原率75% G6PD缺陷：定性（＋），半定量70%。 2、氰化物-抗坏血酸试验 原理：略 结果：正常血液几小时后变暗色 意义：G6PD缺乏者血液变成棕色（巧克力色），纯合子在2h内即变色，杂合子要3~4h变化 3、变性珠蛋白小体生成试验 受检RBC＋乙酰苯肼 作活体染色（甲基紫） 37℃1~2h 有变性珠蛋白小体，则膜上形成紫黑色颗粒 下一张 G6PD缺乏致GSH减少，高铁Hb增多，形成Heinz小体 体外活体染色后，光镜下发现的1~2μm颗粒状折光小体。 结果：正常人30% 意义：见于不稳定血红蛋白病、G6PD缺陷症和芳香族苯胺或硝基类化合物中毒所致的溶贫。 4、G6PD PK活性测定 四、珠蛋白生成异常试验 包括血红蛋白电泳、 HbF定量测定（碱变性试验）等 五、免疫性溶血的检验 1、抗人球蛋白试验（Coombs` test） 直接法、间接法 直接抗人球蛋白试验（DAGT） 测RBC表面结合的抗体（更重要，价值高） 受检者RBC悬液+等量抗人球蛋白试剂 低速离心后观察凝集