分子生物学试验课常用数据表.PDF

分子生物学实验课常用数据表 一、常用限制性内切酶酶切位点及缓冲液 见 限制 盐 浓 识别顺序 常见限制性内切酶 盐浓度 识别顺序 性内切酶 度* Bam HI 中 G GATCC Bgl II 低 A GATCT Eco 高 G AATTC Eco R V 高 GAT ATC RI Hind 中 A AGCTT Nco I 高 C CATGG III AT Kpn I 低 GGTAC C Sin I 低 G G( TA )CC Nde I 中 CA TATG Sma B I 低 TAC GTA Pst I 中 CTGCA G Sph I GCATG C Sac I 低 CCGC GG Sat II 低 CCGC GG Sal I 高 G TCGAC Xho I 高 C TCGAG Sca I 中 AGT ACT Xma I, Sma I 低 C CCGGG Xba I 高 T CTAGA * 各种限制性内切酶缓冲液 配制成10 倍浓缩液。 1. 根据各酶所需的盐浓度，原则上常配制高盐，中盐和低盐贮存液，但仍以用各厂家配备的缓冲液 为佳 10 × 低盐缓冲液： 100 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5) 100 mmol/LMgCl2 100 mmol/L DTT 10 × 中盐缓冲液： 0.5 mol/L NaCl 100 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5) 100 mmol/LMgCl2 10 mmol/L DTT 10 × 高盐缓冲液： 1 mol/L NaCl 500 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5) 100 mmol/LMgCl2 10 mmol/L DTT 2 ．酶的最佳酶解条件请参阅各厂家的使用说明。不同酶的酶解条件不同。同一种酶由于不同厂家的 产品纯度不一，酶解条件也有差别。 1 二：常用电泳缓冲液 缓冲液 使用液 浓贮存液（1000 mL ） Tris-乙酸（TAE ） 1× ：0.04 mol/L Tris-乙酸 50× ：242g Tris 碱 0.001 mol/L EDTA 57.1 mL 冰乙酸 100 mL 0.5 mol/L EDTA( pH8.0) Tris-磷酸（TPE ） 1× ：0.09 mol/L Tris-磷酸 10× ：108g Tris 碱 0.002 mol