高效液相色谱法同时测定食品中的wy.docVIP

高效液相色谱法同时测定食品中的5种食品添加剂 卞金辉 摘要：建立一种简单、快速、准确的高效液相色谱法同时测定食品中的5种食品添加剂－山梨酸、苯甲酸、糖精钠、乙酰磺胺酸钾、脱氢乙酸。样品用氢氧化钠溶液溶解，经超声提取后，选用AgilentTC-C18分离柱，用甲醇－乙酸铵溶液(0.02mol/L)(8:92，V/V)做流动相，流速为0.8mL/min，以保留时间定性，峰面积定量。结果表明：在0～200μg/mL的线性范围内，相关系数r = 0.9992以上,方法的最低检出限分别为 0.15 mg/kg、0.25mg/kg、0.45 mg/kg、0.17 mg/kg、0.23mg/kg，样品的加标回收率在94% ～103%之间，RSD 为2.01%～4.20%之间，本法与国标法相比，没有显著性差异。 关键词：略 英文题目、摘要及关键词略 食品添加剂是指在食品加工工艺中为了改善食品品质和色、香、味以及防腐等的需要而人为的添加到食品中的化学合成或者天然物质。随着食品科技的飞速发展，食品添加剂种类越来越多，已达数千种之多，消费者对食品中各种添加剂的安全性日益关注，特别是人工合成的添加剂越来越受到人们的重视。作为常见的食品添加剂山梨酸、苯甲酸、糖精钠、乙酰磺胺酸钾和脱氢乙酸常常被食品加工者混合使用添加到食品中以增强口味和延长保质期。这5种添加剂的检测均各自有很多报道[1-10]。由于这些方法采用各自的前处理技术和分析方法，当需要同时检测这5种添加剂时，造成检测费时、费力、费试剂，检测时间长,工作效率低下。为提高工作效率,有必要建立一种快速、简便、高效、同时测定这5种添加剂的方法。目前，用高效液相色谱法同时检测食品中这5种添加剂的分析方法还未见报道。本文用氢氧化钠溶液溶解，经超声提取样品，用高效液相色谱法同时检测食品中的山梨酸、苯甲酸、糖精钠、乙酰磺胺酸钾和脱氢乙酸，具有测定快速、方法简便、结果准确等优点，与国标法相比，没有显著性差异。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 HITACHI公司L-2000高效液相色谱仪，HITACHI公司L-2400紫外检测器等。其它略。 1.2 色谱条件 色谱柱为Agilent TC－C18柱（5μm，250mm×4.6mm），柱温为室温； 用甲醇－乙酸铵溶液（0.02mol/L）(8:92，V/V）做流动相， 流速为0.8mL／min， 使用前需进行超声波脱气处理；紫外检测器，波长为230nm，进样量20μL。 1.3 样品处理 1.3.1 固态食品 取一定量有代表性的固态食品样品放入捣碎机中捣碎，称取2.50～5.00g(准确到0.1mg )试样于25mL的比色管中，加10mL超纯水，摇匀后用氢氧化钠溶液调节pH值为7～8左右。超声提取10 min，再振荡提取10 min后用超纯水定容摇匀。以3500r /min速度的离心5～10min，上清夜经水系0.45μm微孔滤膜过滤后，供高效液相色谱测定。 1.3.2 液态食品 直接称取10.00g(准确到0.1mg )试样于25mL的比色管中，微温搅拌除去二氧化碳，用氢氧化钠溶液调节pH值为7～8左右。超声提取10 min，再振荡提取10 min后用超纯水定容摇匀。以3500r /min速度的离心5～0min，上清夜经水系0.45μm微孔滤膜过滤后，供高效液相色谱测定。 1.4 工作曲线 将标准储备液用超纯水逐级稀释成浓度为10、20、50、100、150、200μg/mL的混合标准溶液系列，经水系0.45μm微孔滤膜过滤后，按照仪器工作条件，在高效液相色谱测定。 样品测定　 处理后的样液经经水系0.45μm微孔滤膜过滤后，按照仪器工作条件，在高效 液相色谱测定，以保留时间定性，峰面积定量。 结果与讨论 2.1 流动相的选择 本文采用甲醇－乙酸铵溶液（0.02mol/L）(8:92,V/V）做流动相， 流速为0.8mL/min。实验结果表明山梨酸、苯甲酸、糖精钠、乙酰磺胺酸钾、脱氢乙酸分离效果好，谱图见图１（略）。具体选择过程略 2.2 波长的选择 由于山梨酸、苯甲酸、糖精钠、乙酰磺胺酸钾、脱氢乙酸在紫外区均有吸收，所以选择紫外检测器。通过波长扫描发现，波长在214nm附近时，只有糖精钠、乙酰磺胺酸钾有良好的吸收，波长在293nm附近时，只有脱氢乙酸有良好的吸收而波长为230nm时山梨酸、苯甲酸、糖精钠、乙酰磺胺酸钾、脱氢乙酸均有良好的吸收，且灵敏度高。所以，本文选择波长为230nm。 2.3 标准曲线及线性范围研究 按照工作曲线方法配制6种不同浓度的山梨酸、苯甲酸、糖精钠、乙酰磺胺酸钾、脱氢乙酸混合标准溶液，按照色谱条件进行测定。试验结果表明：山梨酸、苯甲酸、糖精钠、乙酰磺胺酸钾、脱氢乙酸的浓度在0～200μg/mL内呈线性关系，线性回归方程及相关