[农学]第五讲 RNA的转录与转录后加工一.ppt

细菌的RNA聚合酶 细菌RNA的转录过程 真核生物的RNA聚合酶 转录因子 转录因子 转录因子 转录因子 转录终止与终止因子 原核生物转录终止的机制 原核生物转录终止的机制 真核生物的转录终止 转录的调节控制 噬菌体的时序调控 核心酶的修饰 转录的调节控制 转录的调节控制 反式作用因子 反式作用因子 反式作用因子激活转录的机制 RNA转录的抑制作用 真核生物RNA转录的抑制因子 15个：编码与噬菌体粒子结构与装配有关的基因 转录物Ⅲ T7 RNA聚合酶 12分钟后 14个，2基因：抑制宿主RNA聚合酶；合成复制酶系 转录物Ⅱ T7 RNA聚合酶 6~12分钟 晚期转录 10个, 0.3基因:抑制宿主限制酶 0.7 基因:磷酸化E.coli RNA聚合酶 J 基因:T7 RNA聚合酶, 单链肽 转录物Ⅰ E.Coli RNA聚合酶 前6分钟 早期转录 主要基因及功能 转录组别 聚合酶 时间 转录阶段 T7 噬菌体基因转录的时序控制 真核生物转录的调控 真核细胞基因组DNA的含量非常大，因此，相似的DNA序列出现的次数增加，特异调控的难度加大。解决这个难题的途径有二个： 由组蛋白封闭有关的DNA序列； 多个调控因子同时与邻近的特异DNA部位结合 顺式作用元件与反式作用因子 基因的转录特别是转录起始作用取决于基因组中顺式调控元件与反式作用因子的相互作用。 顺式作用元件是反式作用因子的结合位点，其调控基因转录的作用正是通过反式作用的作用来实现的。 DNA结合结构域 锌指结构 同源结构域 亮氨酸拉链 碱性α-螺旋 螺旋-突环-螺旋 转录激活结构域 酸性α螺旋 富含谷氨酰胺结构 富含脯氨酸结构 转录因子的DNA结合结构域本身并不具有调控转录活性的功能，其转录自学成才化功能是由另一种结构域，即转录因子激活结构域所决定的。 几种假说 成环假说 扭曲假说 滑动假说 渗流假说 * * 第五讲 RNA的转录与转录后加工 RNA转录概述 以DNA为模板合成RNA的过程称为转录。转录以DNA的一条链作为模板合成RNA分子，合成以碱基配对的方式进行，产生的RNA链与DNA模板链互补。 转录也是一种酶促的核苷酸聚合过程，所需的酶叫做DNA指导的RNA聚合酶。 RNA聚合酶的特点 以DNA为模板 都以四种三磷酸核苷为底物 都遵循碱基配对原则 RNA链从5’→3’连续合成 转录过程需要Mn2+或Mg2+ 转录过程不需要引物 RNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性 RNA转录与DNA复制的异同 相同点： 多核苷链的合成都是以5’→3’的方向，在3’-OH末端加核苷酸。 不同点： 对于一个基因组来说，转录只发生在一部分基 因，而且每个基因的转录都受到相对独立的控制； 转录是不对称的； 转录时不需要引物，而且RNA链的合成是连续的。 大肠杆菌RNA聚合酶全酶至少由五个亚基（α2、β、β’、ω）和σ亚基组成，去掉σ亚基的部分称为核心酶。 RNA聚合酶的聚集 无论在体外还是在体外，RNA聚合酶都通过下列四步反应聚集而成： 2α →α2； α2+β→α2β； α2β+β’ →α2ββ’； α2ββ’+σ→α2ββ’σ 识别模板 转录起始 RNA链延伸 转录的终止 对α-鹅膏蕈碱不敏感 可被利福平所抑制 叶绿体RNA 叶绿体 叶绿体RNA聚合酶 对α-鹅膏蕈碱不敏感 可被利福平所抑制 线粒体RNA 线粒体 线粒体RNA聚合酶 对α-鹅膏蕈碱中等敏感 转录小RNA的基因，包括tRNA、5SrRNA U6snRNA和scRNA 核质 RNA聚合酶Ⅲ 对α-鹅膏蕈碱敏感 转录所有编码蛋白质的基因和大多数核内小RNA 核质 RNA聚合酶Ⅱ 对α-鹅膏蕈碱不敏感 转录45SrRNA前体，经加工产生5.8S rRNA、18SrRNA和28SrRNA 核仁 RNA聚合酶Ⅰ 对抑制物的敏感性 功能 分布 酶的种类 启动子 RNA聚合酶启动子是RNA聚合酶结合到DNA分子上，发生结合的特殊位置。 不同的启动子对RNA聚合酶的亲和力不同，所结合的反式作用因子也不同，因此，基因转录活性也很不相同。 大肠杆菌的启动子顺序 -10序列(Pribnow框)：保守序列TATAAT -35序列(识别区)：保守序列TTGACA 根据其合成的蛋白质分子的多少，启动子可分为强启动子和弱启动子。 原核生物启动子的共同点 结构典型 序列保守 位置和距离都比较恒定 直接和多聚酶相结合 常与操纵子相邻 都在其控制基因的5’端 决定转录的启动和方向 真核生物启